糖尿病视网膜病变血浆microRNA-126的相对表达及临床意义

发布时间：2017-10-28 08:15

  本文关键词：糖尿病视网膜病变血浆microRNA-126的相对表达及临床意义

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【摘要】：目的microRNA-126是一种与炎症和缺氧诱导新生血管有关的转录调节因子,而研究表明糖尿病视网膜病变(DR)的发生和发展过程均有炎症的参与,微小血管通透性改变最终导致视网膜缺血缺氧。通过检测DR患者血浆microRNA-126相对表达水平的变化,明确microRNA-126与DR发生发展的关系;分析血浆microRNA-126与患者性别、年龄、病程、疾病分期等因素的相关性,探讨血浆microRNA-126相对表达含量在评估DR发生风险、严重程度及预后等方面的临床价值。方法收集单纯糖尿病患者全血样本55例,其中无明显视网膜病变组13例、轻度NPDR组10例、中度NPDR组11例、重度NPDR组12例、PDR组9例,以12例健康成年人作对照,提取血浆总RNA后,采用RNA加尾和引物延伸,运用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative Real Time-Polymerase Chain Reaction,qRT-PCR)法检测血浆microRNA-126的表达水平;采用统计学软件SPSS19.0进行数据分析,用单因素方差分析方法比较各组miRNA-126的表达水平,并采用Pearson相关以及偏相关分析miRNA-126与性别、年龄、病程、疾病分期等临床资料的相关性。结果糖尿病视网膜病变(DR)组microRNA-126相对表达含量明显低于正常对照组,P0.00,差异有统计学意义;microRNA-126在糖尿病视网膜病变各组的相对表达含量随视网膜病变严重程度加重而减少,组间比较结果示无明显视网膜病变组含量(3.87±0.36)较轻度NPDR组(3.22±0.51)相比有显著差异,轻度NPDR组(3.22±0.51)与重度NPDR组(2.83±0.33)比较有显著差异,中度NPDR组(3.06±0.49)与轻度和重度NPDR组比较均无显著差异,重度NPDR组较PDR组(2.22±0.34)比较有显著差异,各组间相比差异有统计学意义(P0.00);Pearson相关分析示miRNA-126的相对含量与患者性别、年龄、血糖控制是否稳定无关,与病程(r=-0.396,P=0.020)和疾病分期(r=-0.833,P0.000)有显著性相关。结论血浆miRNA-126表达含量随DR疾病加重而逐渐减少,与DR严重程度呈明显负相关,同时,糖尿病病程是影响血浆microRNA-126表达的因素。由于microRNA-126可以维持血管发育稳定性并且抑制炎症反应,因此推测microRNA-126的减少可能参与了DR的发生发展过程,其血浆相对表达含量对糖尿病视网膜病变的临床严重程度及预后判断具有参考意义,也为糖尿病视网膜病变的临床靶向治疗提供了新的生物学标志。
【关键词】：糖尿病视网膜病变 microRNA-126 新生血管 炎症
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R587.2;R774.1
【目录】：

• 摘要7-9
• ABSTRACT9-11
• 第1章 前言11-13
• 第2章 实验材料和方法13-21
• 2.1 实验材料13-15
• 2.1.1 研究对象13
• 2.1.2 主要试剂13-14
• 2.1.3 主要器材14
• 2.1.4 引物合成14-15
• 2.1.5 主要试剂配制15
• 2.1.5.1 无RNA酶水的配制15
• 2.1.5.2 50′TAE电泳缓冲液的配制15
• 2.2 实验方法15-21
• 2.2.1 病例资料搜集15-16
• 2.2.2 血浆的提取16
• 2.2.3 血浆总miRNA的提取16
• 2.2.4 总miRNA浓度和纯度的测定16-17
• 2.2.5 miRNA加尾和逆转录反应17-18
• 2.2.6 荧光定量PCR反应18
• 2.2.7 琼脂糖凝胶电泳18-19
• 2.2.8 产物测序19
• 2.2.9 统计学处理19-21
• 第3章 实验结果21-27
• 3.1 患者基本信息统计21
• 3.2 RNA浓度和纯度结果21
• 3.3 PCR扩增曲线和溶解曲线21-22
• 3.4 琼脂糖凝胶电泳结果22-23
• 3.5 测序结果23-24
• 3.6 扩增效率24
• 3.7 血浆miRNA-126 相对含量表达分析24-25
• 3.8 miRNA-126 与一般资料相关性分析25-27
• 第4章 讨论27-31
• 4.1 临床一般资料27
• 4.2 miRNA检测方法27-28
• 4.3 miRNA-126 对DR新生血管和炎症的作用及意义28-31
• 第5章 结论与展望31-33
• 参考文献33-37
• 视网膜缺氧疾病中玻璃体液介质及其作用 文献综述37-47
• 参考文献43-47
• 硕士期间的科研成果47-48
• 致谢48

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 王小玲;胡咏梅;;糖尿病患者视网膜病变患病率及影响因素分析[J];中国现代医生;2015年02期

2 陈波;者明伟;廖泽容;徐天勇;卢敏南;赵洪波;;hsa-miR-126的靶基因预测及功能分析[J];昆明医科大学学报;2014年11期

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 梁丹;2型糖尿病视网膜病变的相关影响因素研究[D];河北医科大学;2012年

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本文编号：1107383