纳米载体介导沉默Survivin基因对鼻咽癌细胞增殖凋亡及放疗敏感性的影响

发布时间：2017-10-31 19:22

  本文关键词：纳米载体介导沉默Survivin基因对鼻咽癌细胞增殖凋亡及放疗敏感性的影响

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【摘要】：目的:探讨纳米载体转染沉默鼻咽癌CNEII细胞中Survivin基因后,CNEII细胞增殖、凋亡及对放疗敏感性的改变。方法:制备聚乙烯亚胺(PEI)-四氧化三铁(Fe3O4)磁性纳米粒,用PEI-Fe3O4磁性纳米粒包被miRNA-Survivin质粒(纳米干扰质粒),将CNEII细胞分为空白对照组(不加质粒,C组)、加纳米干扰质粒组(S组)及加miRNA-NC对照质粒组(NC组);3组细胞转染48 h后,荧光显微镜下观察质粒所带绿色荧光蛋白EGFP的表达,进行细胞计数,计算转染效率;利用Real Time RT-PCR及Western Blot方法检测Survivin mRNA及蛋白表达抑制情况;转染24、48、72及96 h时用MTT法检测3组细胞的增殖情况,转染48 h时用放射线照射3组,采用流式细胞术检测3组细胞放射线照射前后的细胞凋亡率。结果:转染48 h后,加入包被miRNA-Survivin质粒的PEI-Fe3O4磁性纳米粒的CNEII细胞转染效率为(60.9±3.9)%、mRNA表达抑制率为96.5%、蛋白表达抑制率为82.5%,均高于C组和NC组(P0.05),说明构建PEI-Fe3O4磁性纳米粒成功;MTT结果显示48 h以后S组细胞的吸光度值低于NC组和C组,说明细胞增殖被抑制;转染48~72 h CNEII细胞施以6Gy的放射线照射,射线照射后S组细胞凋亡率高于S组照射前(P0.05),S组细胞凋亡率高于NC组和C组(P0.05)。结论:鼻咽癌CNEII细胞沉默Survivin基因后的细胞的增殖被抑制、凋亡数增加,放射线照射凋亡更明显。
【作者单位】： 贵州医科大学;贵州医科大学分子生物学重点实验室;贵州医科大学附院耳鼻咽喉科;
【关键词】： 鼻咽癌 Survivin基因 细胞增殖 细胞凋亡 放疗敏感性
【基金】：国家自然科学基金地区科学基金项目(NO.81260353)
【分类号】：R739.63
【正文快照】： 鼻咽癌是中国常见的恶性肿瘤之一,以南方地区为主,是头颈部恶性肿瘤的首位。目前临床上放射治疗鼻咽癌多采用调强放射治疗,患者的5年生存率为70%[1],但仍有部分患者经放射治疗后不能得到满意效果,如何提高鼻咽癌的放射敏感性已成为目前临床治疗的难点和研究的重点。凋亡相关基

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