鼻咽癌细胞来源外泌体的提取和鉴定

发布时间：2017-11-03 11:42

  本文关键词：鼻咽癌细胞来源外泌体的提取和鉴定

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【摘要】：目的从鼻咽癌细胞系CNE-1、CNE-2及SUNE-1中分离外泌体,并对CNE-2所得外泌体进行鉴定。方法使用Exo Quick-TC(SBI)试剂盒法从鼻咽癌细胞系CNE-1、CNE-2及SUNE-1培养上清液分离出外泌体,使用透射电镜观察其形态特征,BCA法进行蛋白定量,Western blot进行外泌体特异性抗原分子CD63及筏蛋白-1鉴定。结果 3种鼻咽癌细胞系培养上清液中均分离出大量泡状物,透射电镜下观察呈圆形的囊泡,直径为40~130 nm,具有完整胞膜。且CNE-2来源的此种泡状物表达外泌体特异性膜筏蛋白-1、CD63。10mL对数生长期CNE-2培养上清液得到487μg/m L(以蛋白计)的外泌体200μL。结论本实验室保存的3种鼻咽癌细胞系很可能均能产生外泌体,Exo Quick-TC(SBI)法能够简便快速地从鼻咽癌细胞系中提取到外泌体,不需要超速离心,为鼻咽癌的防治研究提供了新的研究方法和靶点。
【作者单位】： 广东医学院附属医院耳鼻咽喉科;广东医学院生物化学与分子生物学研究所;
【关键词】： 鼻咽癌细胞 外泌体 分离 鉴定
【基金】：广东省医学科研基金资助课题(编号:B2014297) 广东省湛江市科技计划项目(编号:2014B01070)
【分类号】：R739.63
【正文快照】： 524023)鼻咽癌是位于头颈部的上皮细胞源性恶性肿瘤,恶性程度高,诊疗困难,病死率高,严重危害人类健康。鼻咽癌好发于非洲北部、东南亚以及中国南方各省,尤其是广东省。放疗或放化疗联合是早期鼻咽癌的主要治疗方案。放疗及综合化疗策略的改进改善了初期鼻咽癌患者的预后[1]。

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本文编号：1136069