18β-甘草次酸对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜中CCL11、AQP-1和EOS表达的影响

发布时间：2017-11-25 09:24

  本文关键词：18β-甘草次酸对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜中CCL11、AQP-1和EOS表达的影响

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【摘要】：目的①制备Wistar大鼠变应性鼻炎(allergic rhinitis, AR)模型。②观察正常大鼠和AR大鼠鼻黏膜中嗜酸粒细胞趋化因子-1(eotaxin-1, CCL11)、水通道蛋白-1(aquaporin-1, AQP-1)的表达水平和嗜酸粒细胞(eosinophil, EOS)的募集程度。③探讨18β-甘草次酸(glycyrrhetinic acid, GA)灌胃对AR大鼠症状行为学、鼻黏膜中CCL11、AQP-1的表达水平和EOS浸润程度的影响及其相互作用的有关机制。方法①建立AR模型：Wistar大鼠,雄,180-220 g,随机分为生理盐水对照组(NC组)、AR无干预组(AR组)、氯雷他定(loratadine, LOA)干预组(LOA组)、18β-GA干预组(18β-GA组)。1-14 d,以Al(OH)3 30mg为免疫佐剂,AR、LOA和18β-GA组大鼠腹腔注射0.3 g OVA(ovalbumin, OVA)和生理盐水(normal saline, NS)的1 mL混匀液,隔日1次,持续14天,作为基础致敏。14-21 d,双侧鼻腔各滴入2%OVA与NS的混匀液,每次一侧鼻腔50 uL,每日1次,持续7天,作为鼻腔激发,建立AR大鼠模型。造模过程中,NC组大鼠以同量的NS替代作为对照,方法同其他组,并以被动皮内过敏反应(PCA)实验及大鼠AR症状行为学表现评估造模结果。②灌胃干预：第21d始LOA和18β-GA组分别给予LOA和18β-GA每日1次灌胃,持续3周,NC及AR组以同量的NS代替,方法同其他组。③结果观察：分别于灌胃干预1、2、3周后比较各组大鼠AR症状变化及行为学叠加量化评分；以P-actin作为内参,取大鼠鼻黏膜行实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CCL11基因的相对表达量；用免疫组化(SP)法观察各组大鼠鼻黏膜中AQP-1的表达水平；光学显微镜下,通过苏木精-伊红(HE)染色观察鼻黏膜组织结构的变化和每高倍镜视野(×400)中EOS的数量。④数据分析：实验数据用SPSS19.0软件统计分析。结果 ①AR模型的鉴定：AR,LOA、18β-GA组大鼠基础致敏结束后行PCA实验均提示阳性,完成鼻腔激发后,观察3组大鼠的鼻部症状,发现均有挠鼻、流清水涕和频繁喷嚏的表现,症状叠加评分均高于5分,说明模型制造成功。②与NC、LOA、18β-GA组相比,AR组大鼠在1、2、3周时均出现典型AR鼻部症状,行为学叠加量化评分高于5分,鼻黏膜中CCL11 mRNA、AQP-1的表达水平和EOS的浸润程度较NC组显著增高(P0.05)。③各时间点,LOA组大鼠的鼻部症状较AR组明显减轻,行为学叠加量化评分、鼻黏膜中CCL11 mRNA的相对表达量、AQP-1的平均光密度值和EOS的浸润程度均显著低于AR组(P0.05)。④18β-GA组大鼠1周时,上述各项检测结果与AR组比较下降(P0.05),但比LOA组高(P0.05),2周后各结果均接近于LOA组、NC组(P0.05)。结论①本研究以OVA作为过敏原,完成了Wistar大鼠AR模型的制备。②正常大鼠鼻腔黏膜有少量的CCL11、AQP-1和EOS分布；在OVA致敏的AR大鼠模型中,鼻腔黏膜出现慢性炎症改变,表现为典型的AR症状,鼻黏膜中CCL11、AQP-1的表达水平明显增高的同时,EOS在鼻腔黏膜的募集程度亦随之增加。③与LOA灌胃比较,18β-GA灌胃干预AR大鼠,能够明显改善AR症状,恢复鼻黏膜组织结构的异常改变,并能降低CCL11、AQP-1在鼻黏膜的分泌和EOS的募集,最终对AR的炎症反应起到抑制作用。
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R765.21

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