饱和氢生理盐水对噪声性聋的防治研究

发布时间：2018-02-01 22:34

本文关键词： 噪声性聋饱和氢生理盐水预防修复抗氧化活性氧 pH值　出处：《福建医科大学》2012年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目前越来越多的人受到噪声性聋（Noise Induced Hearing Loss, NIHL）的困扰，噪声性聋引起的感音神经性聋多为不可逆损伤，目前尚无有效的治疗方法。因此，预防成为研究的重点。最新研究发现，饮用饱和氢气水可减轻白噪声引起的听力损害[1]，但作用机理仍不明确，仍需全面深入的研究来揭示其规律特点。为此本实验设计通过腹腔注射饱和氢生理盐水，首次从听功能、形态学及生物化学等多方面来综合探讨饱和氢生理盐水对脉冲噪声引起的听力损害的防治作用及其保护机理。第一部分饱和氢生理盐水对噪声性聋动物保护模型的建立目的：建立噪声性聋动物模型，初步验证饱和氢生理盐水是否具有预防噪声性聋的作用。方法：取体重250～300g，清洁级白色健康、ABR阈值正常雄性Hartley豚鼠18只。随机分成5组，正常组2只，空白对照组（单纯噪声暴露）、生理盐水对照组（噪声暴露前1小时腹腔注射等体积的生理盐水，1ml/100g）、饱和氢生理盐水组（单纯腹腔注射饱和氢生理盐水）、饱和氢生理盐水处理组各4只，（噪声暴露前1小时腹腔注射饱和氢生理盐水，1ml/100g）。给予脉冲噪声（压力峰值157dB SPL，脉宽0.25ms）连续暴露100次。分别于脉冲噪声暴露后4小时、14天处死动物行扫描电镜观察。结果：扫描电镜结果显示噪声暴露后4小时毛细胞以底圈上半圈至第二圈下半圈损伤最重，空白对照组及生理盐水对照组内毛细胞纤毛广泛性缺失、融合，外毛细胞3排静纤毛全部缺失。饱和氢生理盐水处理组纤毛的缺失程度明显少于对照组。噪声暴露后14天的耳蜗毛细胞损伤重于噪声暴露后4小时。结论：成功构建噪声性聋动物模型，初步验证饱和氢生理盐水对噪声性聋动物模型具有一定的预防作用，可明显减轻脉冲噪声对内耳的损害。第二部分饱和氢生理盐水对噪声性聋的预防及修复作用目的：探索最佳给药时间及饱和氢生理盐水是否对噪声性聋具有促进修复的作用。方法：通过噪声暴露前即刻、1小时、2小时腹腔注射饱和氢生理盐水寻求最佳给药时间，于脉冲噪声暴露后即刻、1、2、4、8天测试听性脑干反应(auditorybrainstem respons，ABR)；第8天采用琥珀酸脱氢酶(Succinate Dehydrogenase，SDH)、硝酸银（AgNO_3）及免疫组化染色等多种技术方法观察毛细胞的形态学变化。结果：ABR测试结果显示噪声暴露后在各时间点的ABR阈值饱和氢生理盐水处理1小时、2小时组与对照组均差异显著。饱和氢生理盐水处理1小时、2小时组ABR阈值恢复程度明显快于空白对照组及盐水对照组。形态学结果显示饱和氢生理盐水处理组动物耳蜗外毛细胞虽存在SDH着色变浅，存在片状无染色区的改变，与对照组相比，细胞肿胀现象减轻，细胞缺失数明显减少，排列较规则,尤以饱和氢生理盐水处理1小时组显著。AgNO_3染色与激光共聚焦结果同样呈现饱和氢生理盐水处理1小时、2小时组外毛细胞和纤毛缺失明显减少的表现。结论：噪声暴露前1小时腹腔注射饱和氢生理盐水可有效拮抗脉冲噪声引起的耳蜗损伤，能够对噪声性聋起到一定程度的预防和修复作用。第三部分饱和氢生理盐水对噪声性聋的防治机理研究目的：通过检测豚鼠血浆中总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase，T-SOD)活性、超氧阴离子（O_2-）活性、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量和及耳蜗组织中T-SOD及O_2-活性来研究饱和氢生理盐水对噪声性聋的防治机理。方法：于噪声暴露前和噪声暴露后2h,分别取血测定血浆中的T-SOD及O_2-活性、MDA含量；噪声暴露后2h抽血后，立即断头处死豚鼠，取出双侧耳蜗，测定耳蜗组织中的T-SOD及O_2-活性。结果：各组血浆中的T-SOD及O_2-活性、MDA含量在噪声暴露前后均无统计学差异，在噪声暴露后各组间也无统计学差异，P0.05。空白对照组与生理盐水对照组耳蜗组织中的T-SOD活性无统计学差异，P0.05，但二者均与正常组和饱和氢生理盐水处理1小时组有明显统计学差异，P0.05。结论：饱和氢生理盐水具有抗氧化作用，可有效清除耳蜗组织中大量氧自由基，减轻噪声引起的听力损失。第四部分噪声暴露对成年豚鼠动脉血气及电解质的影响目的：初步探讨脉冲噪声暴露对成年豚鼠动脉血气及电解质的影响。方法：各组分别于脉冲噪声暴露后即刻、1h、2h、4h心包穿刺采血约1ml测动脉血气及K~+、Na~+、Cl~-、Ca~(2+)的浓度。结果：噪声暴露后，空白对照组pH呈升高趋势，但各组动脉血气pH值均保持在正常范围内波动，各组间及各组在不同时间点均无统计学差异，P0.05；噪声暴露后即刻、1h，空白对照组Ca~(2+)浓度升高，与正常组、饱和氢生理盐水组差异显著，P0.05；钾离子浓度于噪声暴露后即刻，空白对照组与饱和氢生理盐水处理组有统计学差异，P0.05；钠离子浓度于噪声暴露后即刻、1h、2h，正常组与其余各组间均有统计学差异，P0.05。结论：脉冲噪声可能致成年豚鼠的动脉血气pH及血浆Ca~(2+)浓度升高。
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【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R764.433

【参考文献】