共培养的角膜上皮细胞诱导人羊膜上皮细胞分化为角膜上皮样细胞
发布时间:2018-03-11 14:36
本文选题:羊膜上皮细胞 切入点:角膜 出处:《细胞与分子免疫学杂志》2017年04期 论文类型:期刊论文
【摘要】:目的探讨体外培养人羊膜上皮细胞(HAEC)并定向诱导分化为角膜上皮样细胞的可行性。方法采用Ⅱ型胶原酶和胰蛋白酶消化分离培养HAEC,通过Transwell~(TM)非接触共培养系统与人角膜上皮细胞(CEC)进行共培养2周,诱导HAEC分化;通过免疫荧光细胞化学染色法检测诱导后HAEC中细胞角蛋白3+12(CK3+12)、CK14、CK19、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测分化细胞CK12、CK14、CK19、P63 m RNA水平,Western blot法检测HAEC诱导前后CK3+12、CK14、CK19、P63的蛋白水平。结果体外培养的HAEC和CEC形态相似,免疫荧光细胞化学染色检测到HAEC诱导分化细胞CK3+12、CK14、CK19、PCNA呈阳性表达,诱导后HAEC中P63、CK12、CK19、CK14 mRNA相对表达量分别为共培养前的3.35、6.76、2.42、1.06倍。结论在与CEC共培养2周后,HAEC可以转分化为角膜上皮样细胞,HAEC可用作组织工程角膜重建的种子细胞。
[Abstract]:Objective to investigate the feasibility of cultured human amniotic epithelial cells (HAECs) in vitro and to differentiate them into corneal epithelioid cells. Methods HAECs were isolated and cultured by type 鈪,
本文编号:1598605
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