非聚焦超声对圆窗膜通透性的影响及其在鼓室药物投放中的安全性和有效性研究

发布时间：2018-03-23 17:10

  本文选题：非聚焦超声　切入点：鼓室给药　出处：《中国人民解放军医学院》2015年博士论文

【摘要】：目的：应用听性脑干反应(auditory brainstem response, ABR)、耳蜗荧光染色等方法观察低强度的非聚焦超声(Non-focused ultrasound, NFU)作用于豚鼠圆窗膜在辅助经鼓室—内耳给药中的安全性。应用液相质谱法检测豚鼠外淋巴液中的药物浓度,观察NFU对圆窗膜的促渗作用及其药代动力学改变。进一步明确NFU辅助经鼓室—内耳给药的有效性,以期探索该技术的临床应用价值与可行性。方法：1、听觉电生理测试：选取健康豚鼠,先行测量ABR阈值和Ⅲ波潜伏期,随后分组接受不同强度和时间的NFU照射,完成后30分钟再次接受ABR检查。对照射前后的ABR阈值和Ⅲ波潜伏期进行比较,了解有无听力损害发生。2、耳蜗毛细胞荧光染色观察：将豚鼠分组接受不同强度的NFU短时间照射,随后取出听泡,对耳蜗进行AO/EB染色,基底膜铺片,荧光显微镜下观察胞核的染色,了解细胞受损的情况。3、外淋巴高效液相质谱仪分析：首先建立液相质谱仪浓度-面积曲线。在豚鼠的听泡内注入地塞米松溶液,并使用不同强度的NFU照射听泡。10分钟后取出听泡,提取外淋巴液进行液相质谱检测,计算浓度并分组比较,分析NFU照射对外淋巴液中药物浓度的影响。结果：1、电生理检查发现,在本研究设定强度下(1.0-3.5 W/cm2) 1MHz的NFU照射1-3min后,豚鼠ABR反应阈、潜伏期与照射前相比并未见统计学意义上的改变(p0.05) 。2、耳蜗基底膜铺片荧光染色观察,1-3.5W/cm2强度下1MHz的NFU照射3mmin后,豚鼠耳蜗顶回、中回与底回均未见毛细胞明显受损,与对照组比较,毛细胞损伤的数量未见统计学意义上的差异(p0.05)。3、根据液相质谱仪的检测结果,照射强度为2W/cm2组外淋巴液的平均药物浓度为213.07ng/ml,3W/cm2组的平均浓度为568.5ng/ml,3.5W/cm2组的平均浓度为1635.61ng/ml,而空白对照组的平均浓度为86.57ng/ml。各组之间比较,p值均0.05,统计学差异明显,最大浓度差可达18.89倍。结论：1、3.5W/cm2强度以下的NFU短时程照射不会造成豚鼠ABR的显著改变。短时程、低强度的非聚焦超声听泡照射这一无损伤技术对豚鼠的听力是安全的。2、低于3.5W/cm2强度的非聚焦超声短时暴露未见导致豚鼠毛细胞的形态学损伤。3、非聚焦超声辅助可以有效提高圆窗膜的通透性,这一促渗透作用可以增加经鼓室—内耳药物投放的有效性,相同照射时间下,该效应与超声的强度呈正相关。
[Abstract]:Objective: to observe the safety of low-intensity non-focused ultrasound (NFU) acting on guinea pig round window membrane in transtympanic and inner ear administration by means of auditory brainstem response (ABR), auditory brainstem response (ABR) and cochlear fluorescence staining. Detection of drug concentration in perilymph of guinea pigs, To observe the effect of NFU on the permeation of circular window membrane and its pharmacokinetic changes, to further determine the effectiveness of NFU assisted transtympanic and inner ear administration. In order to explore the clinical application value and feasibility of the technique, methods: 1, auditory electrophysiological test: select healthy guinea pigs, first measure the threshold value of ABR and the latency of wave 鈪，

本文编号：1654394