老年性耳聋患者与健康老年人耳道菌群对比分析的研究

发布时间：2018-04-01 03:34

本文选题：耳聋　切入点：生物量　出处：《大连医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：目的:研究听力正常老年人与老年性耳聋患者耳道微生态系菌群生物量与生物多样性,探索耳道微生态系菌群构成,为深入研究各个微生态细菌群协同作用打下坚实的基础,也为临床耳道感染的防治和指导抗生素精准使用提供依据。方法:1.选择2015年1月到2016年1月于大连医科大学附属第一医院耳鼻喉头颈外科门诊就诊的人群29例,分为二组,老年性耳聋组(耳聋组)和听力正常组(对照组)。耳聋组患者13例,对照组患者16例。二组患者就诊前的3个月各有2例有抗生素使用史,分别为阿米卡星、阿奇霉素、头孢菌素(剂量和出厂商不详),其余没有。2.采用传统稀释滴定培养法、PCR-DGGE法检测听力正常老年人和老年性耳聋患者耳道微生态系菌群的生物量和多样性。3.采用分区划线分离培养、全自动微生物鉴定与药敏系统,对老年人耳道微生态系菌群进行药物敏感实验。结果:1.老年人耳道微生态系菌群生物量结果显示,经传统稀释滴定培养,计数106稀释倍数下,耳聋组菌落数为71.5±10.73cfu/g,正常对照组菌落数为72.83±6.24cfu/g,两组比较,耳聋组与正常对照组菌落数无显著差异(p0.05);即耳聋组与正常对照组菌落数生物量一致。2.老年人耳道微生态系菌群需氧和厌氧培养菌落数结果显示,耳聋组需氧培养菌落数为77.67±8.50cfu/g,厌氧培养菌落数为65.33±10.7cfu/g;对照组需氧培养菌落数为71.67±3.06cfu/g,厌氧培养菌落数为74.00±9.17cfu/g,两组比较,没有统计学差异(p0.05);即耳聋组需氧培养菌落数与对照组需氧培养菌落数一致,耳聋组厌氧培养菌落数与对照组厌氧培养菌落数一致,说明两组的菌群分布基本一致。3.老年人耳道微生态系菌群形态样品经培养24h和48h后,观察cba平板的菌落形态,耳聋组需氧培养可见圆形凸起,边缘整齐,白色,无溶血环的菌落;耳聋组厌氧培养可见圆形凸起,表面光滑,淡黄色,菌落周围有全透明溶血环的菌落和白色,无溶血环的菌落;正常对照组需氧培养可见圆形凸起,边缘整齐,表面光滑,湿润,白色菌落;正常对照组厌氧培养可见圆形凸起,边缘整齐,表面光滑,湿润,白色菌落。挑取菌落,经革兰染色,显微镜下观察,可见耳聋组需氧细菌形态为革兰阳性、矛头状成对排列、短链状排列、无芽孢、无荚膜;耳聋组厌氧细菌形态为革兰阳性、葡萄状排列、无芽孢、无荚膜;正常对照组需氧细菌形态为革兰氏阳性,矛头状成对排列、短链状排列、无芽孢、无荚膜;正常对照组厌氧细菌形态为革兰阳性、葡萄状排列无芽孢、无荚膜。4.老年人耳道微生态系菌群核酸dna总量变化结果显示,经qiaampdnastoolminikit提取,分光光度计检测,计算后,可见耳聋组总核酸dna为281.50±26.60(mg/ml),正常对照组总核酸dna为366.50±28.62(mg/ml),两组比较,差异显著,具有统计学意义(p0.05),耳聋组总核酸dna量低,正常对照组核酸dna总量高,说明耳聋患者的微生态菌群的数量少。5.老年人耳道微生态系菌群pcr-dgge电泳与聚类分析结果结果显示,二组耳道微生态系菌群的pcr-dgge电泳图谱可见,耳聋组患者的优势条带为28.46±2.76条;正常对照组的优势条带为29.88±2.96条,两组比较,优势条带数没有差别(P0.05),但是其条带的明暗程度不同,说明在二组同一细菌的含量有差别。6.老年人耳道微生态系菌群多样性分析结果显示,利用Quantity One软件对耳聋组与对照组耳道菌群样本PCR-DGGE图谱进行UPGMA树状图聚类分析,从二组耳道微生态系菌群的PCR-DGGE电泳图谱的凝胶聚类分析可见,耳聋组与正常对照组微生态菌群聚为一类,说明两组的微生态菌群的多样性是一致的。7.老年人耳道微生态系菌群特异性条带测序结果结果显示,利用测序方法,对老年人耳道微生态系菌群检测可见:表皮葡萄球菌、山羊葡萄球菌、里昂葡萄球菌、类白喉棒状杆菌、dentisani链球菌、argensis葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌和tengchongensis栖热菌。8.两组所分离培养的菌落进行自动鉴定和药敏实验结果结果显示,对老年人耳道微生态系菌群发现:两组所分离的菌落药敏实验结果表明,粪肠球菌对青霉素、氨苄西林敏感,对氨基糖苷类抗生素耐药,对万古霉素敏感;金黄色葡萄球(耐甲氧西林菌株MRSA)菌对青霉素、庆大霉素、红霉素、四环素耐药,对克林霉素、利福霉素耐药,对万古霉素、呋喃妥因和替考拉明敏感;表皮葡萄球菌对青霉素、红霉素、复方新诺明耐药,万古霉素、利奈唑胺敏感;肺炎链球菌对红霉素、阿奇霉素、对克林霉素耐药、四环素、复方新诺明耐药,对万古霉素、利奈唑胺敏感。结论1.老年性耳聋患者与听力正常老年人耳道微生态系菌群需氧和厌氧的种类没有明显改变,耳聋组与正常对照组菌落数生物量一致,耳聋组总核酸DNA量低,正常对照组核酸DNA总量高,耳聋患者的微生态菌群的数量少。2.老年性耳聋患者与听力正常老年人耳道微生态系菌群的多样性是一致的。3.老年人耳道菌群细菌未见特殊耐药性变异株。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：大连医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R764.436

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