p62在喉癌Hep-2细胞化疗耐药中的作用

发布时间：2018-04-02 21:25

  本文选题：p　切入点：喉癌　出处：《中国病理生理杂志》2017年06期

【摘要】：目的:探讨p62在喉癌细胞Hep-2化疗耐药中的作用及潜在的作用机制。方法:实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-q PCR)及Western blot法检测喉癌耐药细胞Hep-2/5-FU及其亲本细胞Hep-2中p62的表达水平。在Hep-2/5-FU细胞中转染p62 siRNA敲减p62的表达,采用CCK-8法和流式细胞术检测细胞生存率及细胞凋亡状态;检测细胞中丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)的活性来反映细胞氧化应激水平。Western blot检测细胞凋亡相关调控因子Bcl-2、Bax、caspase-8/cleaved caspase-8、caspase-3/cleaved caspase-3的蛋白水平及抗氧化通路Keap1/Nrf2的活性。结果:耐药细胞株Hep-2/5-FU中p62的mRNA及蛋白表达水平均明显高于亲本细胞株Hep-2;并且在亲本细胞株Hep-2中,p62和Nrf2的蛋白表达水平随着顺铂的浓度增加不断升高。沉默p62可抑制喉癌耐药细胞Hep-2/5-FU的生存,促进其凋亡,上调MDA的含量,降低SOD和GSH-Px的活性,同时上调Bax、cleaved caspase-8、cleaved caspase-3和Keap1的蛋白水平,下调Bcl-2、Nrf2及HO-1的蛋白表达。结论:喉癌耐药细胞Hep-2/5-FU中沉默p62可恢复细胞对5-FU的敏感性,其机制可能与抑制Keap1/Nrf2信号通路的活化、调控细胞内氧化应激反应及细胞凋亡有关。
[Abstract]:Objective: to investigate the role and potential mechanism of p62 in Hep-2 chemotherapeutic resistance of laryngeal carcinoma cells.Methods: Real-time quantitative polymerase chain reaction (RT-q PCR) and Western blot were used to detect the expression of p62 in Hep-2/5-FU and its parent cells.The expression of p62 siRNA knockout p62 was transfected into Hep-2/5-FU cells. The survival rate and apoptosis were detected by CCK-8 and flow cytometry.妫，

本文编号：1702161