Snail1基因沉默对喉鳞癌Hep-2细胞紧密连接蛋白表达及迁移能力的影响

发布时间：2018-04-11 23:38

  本文选题：Snail + 基因沉默　； 参考：《生物医学工程学杂志》2017年04期

【摘要】：本文为研究Snail1基因对喉鳞癌细胞株Hep-2紧密连接蛋白表达及迁移能力的影响,将含有Snail1基因的短发夹RNA(Sh-RNA)的质粒转染喉鳞癌细胞株Hep-2,培养出可稳定传代的Snail1基因沉默的细胞(命名为Sh-snail1细胞)。课题组以蛋白免疫印迹技术检测紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-5的表达是否发生变化。然后设计伤口愈合实验检测其迁移能力,再以蛋白免疫印迹技术检测与细胞迁移能力密切相关的Rho GTP酶家族重要成员Rho A、Cdc42蛋白的表达变化。结果表明,Sh-snail1细胞紧密连接关键蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-5表达明显上调,迁移能力明显减弱,且Rho A、Cdc42蛋白表达下调。该研究表明,喉鳞癌Hep-2细胞通过下调Snail1基因的表达使细胞间连接更加紧密,同时抑制Hep-2细胞的迁移能力,下调Rho A、Cdc42蛋白的表达。本文研究结果证实,Snail1基因与Hep-2细胞转移过程中的细胞间紧密连接打开以及细胞迁移能力增强密切相关,为靶向治疗喉鳞癌提供分子机制的研究依据。
[Abstract]:In order to study the effect of Snail1 gene on the expression and migration ability of Hep-2 tight junction protein in laryngeal squamous cell carcinoma cell line,The plasmid containing Snail1 gene was transfected into laryngeal squamous cell carcinoma cell line Hep-2, and stable passaged Snail1 gene silenced cells (named Sh-snail1 cell line) were cultured.The expression of tight junction protein ZO-1 Occludin-Claudin-5 was detected by Western blot.Then the wound healing experiment was designed to detect its migration ability, and then the expression of Rho AmonCdc42, an important member of the Rho GTP enzyme family, which was closely related to the cell migration ability, was detected by Western blot.The results showed that the expression of tight junction protein ZO-1 Occludin-Occludin-Claudin-5 was up-regulated, the migration capacity was decreased, and the expression of Rho AcanCdc42 protein was down-regulated in Sh-snail1 cells.This study showed that Hep-2 cells of laryngeal squamous cell carcinoma (LSCC) down-regulated the expression of Snail1 gene and inhibited the migration of Hep-2 cells, and down-regulated the expression of Rho AtoCdc42 protein.The results of this study confirm that the Snail1 gene is closely related to the opening of tight intercellular junctions and the enhancement of cell migration in the process of Hep-2 cell metastasis, which provides a molecular basis for the targeted treatment of laryngeal squamous cell carcinoma (LSCC).
【作者单位】： 成都医学院检验医学院;四川大学基础医学与法医学院生物医学工程学院;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(11372203,31670960)
【分类号】：R739.65

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本文编号：1738203