NK细胞在EAU疾病不同时期的分布及表达

发布时间：2018-04-28 18:44

  本文选题：NK细胞 + 葡萄膜炎　； 参考：《安徽医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：背景实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)是葡萄膜炎常见的动物模型。本研究探讨NK细胞在EAU中的作用及其机制。目的探讨不同发病阶段NK细胞在EAU大鼠视网膜组织中的定位分布,以及NK细胞的趋化因子动态表达情况。方法将61只Lewis大鼠随机分成两组:正常对照组和EAU实验模型组。正常对照组采用生理盐水联合完全福氏佐剂和400ng百日咳毒素先后将其免疫,模型组使用光感受器间维生素A类结合蛋白(IRBP)联合完全福氏佐剂和400ng百日咳毒素先后免疫大鼠,建立EAU动物模型,从造模后第1天到第21天,用裂隙灯显微镜进行眼前段的光学检查,根据Caspi方法进行眼部炎症评分,并在病程的第3天、第6天、第9天、第12天、第16天、第21天取材。HE染色检测Lewis大鼠视网膜炎症细胞浸润和组织结构破坏情况,免疫荧光双标方法检测大鼠视网膜NK细胞的分布以及浸润情况,RT-PCR法检测眼球NK细胞趋化因子m RNA的表达情况。结果EAU模型组在接受抗原免疫后的第6天出现炎症,视网膜组织开始肿胀,第12天炎症达到最高峰,炎症细胞明显浸润,组织结构严重破坏,眼前节及视网膜炎症评分为4分,第21天炎症细胞消失,视网膜结构基本恢复。在第6天可见NK细胞,第9天NK细胞显著增加,第12天较第9天明显减少,第16天NK细胞基本消失。CXCL10在第9天较其他时间点具有统计学差异(F=16.997,P0.01),而CXCL12各时间点之间比较均无差异(F=2.851,P0.05)。结论NK细胞在EAU早期发挥重要作用,而CXCL10是EAU中NK细胞的重要的趋化因子。
[Abstract]:Background Experimental autoimmune uveitis (EAU) is a common animal model of uveitis. The purpose of this study was to investigate the role and mechanism of NK cells in EAU. Objective to investigate the localization and distribution of NK cells in the retina of EAU rats and the dynamic expression of NK cell chemokines. Methods 61 Lewis rats were randomly divided into two groups: normal control group and EAU experimental model group. The normal control group was immunized with normal saline combined with complete Freund's adjuvant and 400ng pertussis toxin, while the model group was immunized with complete Freund's adjuvant and 400ng pertussis toxin. From the first day to the 21st day after the establishment of EAU animal model, optical examination of the anterior segment was performed with slit lamp microscope, and the ocular inflammation was scored according to the Caspi method, and on the 3rd, 6th, 9th, 12th, 16th day of the course of the disease. On the 21st day, the infiltration of inflammatory cells and the destruction of tissue structure were detected by HE staining in the retina of Lewis rats. The distribution of NK cells and the infiltration of NK cells in rat retina were detected by immunofluorescence double labeling method. The expression of chemokine m RNA in eyeball NK cells was detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Results in the EAU model group, inflammation appeared on the 6th day after immunization, the retinal tissue began to swell, the inflammation reached the peak on the 12th day, the inflammatory cells infiltrated obviously, the tissue structure was seriously damaged, and the inflammation score of anterior segment and retina was 4 points. On day 21, inflammatory cells disappeared and retinal structure recovered. NK cells were observed on the 6th day, increased significantly on the 9th day, and decreased significantly on the 12th day compared with the 9th day. On the 16th day, NK cells disappeared basically. CXCL10 was significantly different from other time points on the 9th day compared with the other time points, but there was no significant difference between the different CXCL12 time points in F2.851P0.05. Conclusion NK cells play an important role in the early stage of EAU, and CXCL10 is an important chemokine of NK cells in EAU.
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R773.9

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本文编号：1816429