MicroRNA-24增强人鼻咽癌CNE2细胞裸鼠移植瘤放疗敏感性的研究

发布时间：2018-05-14 01:44

  本文选题：microRNA-24 + Sp1　； 参考：《广西医科大学》2016年硕士论文

【摘要】：目的：探讨microRNA-24(miR-24)对人鼻咽癌CNE2细胞裸鼠移植瘤放疗敏感性的影响及其可能机制。从分子基因学的角度出发,为寻找能增强肿瘤放疗敏感性、高效低毒的新型功能性分子提供理论依据。方法：建立人鼻咽癌CNE2细胞裸鼠皮下移植瘤模型,成瘤后将裸鼠随机分为miR-24 agomir组(实验组)、miR-24 agomir NC组(阴性对照组)、生理盐水组(空白对照组)以及DDP组(阳性对照组)共4组.miR-24 agomir组、miR-24 agomir-NC组分别于裸鼠移植瘤瘤腔内注射miR-24 agomir或 miR-24 agomir-NC (10nmol/只,0.1ml/次,1次/4d);DDP组裸鼠移植瘤瘤腔内注射DDP溶液(1.0mg/kg,0.1ml/次,1次/4d);空白对照组给予相同体积的生理盐水；给药次数为两次。第二次给药结束后立即给予8Gy的60Coγ射线照射,放射后每两天测量一次移植瘤长径、短径,计算肿瘤体积。放射16天后处死裸鼠,取移植瘤,绘制肿瘤生长曲线图；Real-timePCR法测定组织中Spl基因mRNA的表达;免疫组化法、Western-blot法测定组织中Spl蛋白的表达。结果：放射后的16天内,miR-24 agomir组肿瘤生长速度明显较miR-24agomir NC组及生理盐水组慢(P0.05),处死裸鼠后,miR-24 agomir组瘤体(748.9±61.9)mm3,显著低于miR-24 agomir NC组(1961.2±126.8)mm3和生理盐水组(2048.0±101.8)Imm3(P0.05),而与DDP组瘤体(597.5±35.0)耐体积相比,无明显差异(P0.05)；与miR-24 agomir NC组和生理盐水组比较,miR-24 agomir组中Sp1的mRNA及蛋白的表达量均低于miR-24 agomir NC组和生理盐水组(P0.05),而与DDP组比较, miR-24 agomir组中Sp1的mRNA及蛋白的表达量高于DDP组(P0.05)。结论：miR-24能增强人鼻咽癌CNE2细胞裸鼠移植瘤的放疗敏感性,其机制可能与下调Sp1有关。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of microRNA-24miR-24 on the radiosensitivity of human nasopharyngeal carcinoma (NPC) CNE2 cells in nude mice and its possible mechanism. From the point of view of molecular genetics, this paper provides a theoretical basis for finding new functional molecules that can enhance the sensitivity of tumor radiation therapy and are highly effective and low toxic. Methods: a subcutaneous transplanted tumor model of human nasopharyngeal carcinoma (NPC) CNE2 cells was established in nude mice. After tumorigenesis, nude mice were randomly divided into 4 groups: miR-24 agomir group (experimental group), control group (negative control group), normal saline group (blank control group) and DDP group (positive control group). MiR-24 agomir or miR-24 agomir-NC 10 nmol / L was injected intravenously into the transplanted tumor of nude mice in the same volume of normal saline. DDP solution of 1.0 mg / kg 0.1 ml / time was injected into the tumor cavity of nude mice, and the blank control group was given the same volume of normal saline as the control group, and the control group was given the same volume of normal saline, and the control group was given the same volume of normal saline. The drug was given twice. 8Gy 60Co 纬 -ray irradiation was given immediately after the second administration. The long and short diameter of the transplanted tumor were measured every two days after irradiation, and the tumor volume was calculated. The nude mice were killed 16 days after radiation and the tumor growth curves were plotted to detect the expression of Spl gene mRNA and the expression of Spl protein in tissues by immunohistochemistry and Western-blot. Results: the tumor growth rate of miR-24 agomir group was significantly slower than that of miR-24agomir NC group and normal saline group within 16 days after radiation, and the tumor volume of miR-24 agomir NC group was significantly lower than that of DDP group (597.5 卤35.0), and the tumor volume of miR-24 agomir NC group was 748.9 卤61.9 卤61.9 mm ~ (-3), significantly lower than that of miR-24 agomir NC group (1961.2 卤126.8)mm3) and saline group (2048.0 卤101.8 Imm3P0.05). Compared with miR-24 agomir NC group and normal saline group, the expression of mRNA and protein of Sp1 in miR-24 agomir group was lower than that in miR-24 agomir NC group and normal saline group (P 0.05). Compared with DDP group, the expression of Sp1 mRNA and protein in miR-24 agomir group was higher than that in DDP group (P 0.05). Conclusion: 1 miR-24 can enhance the radiosensitivity of human nasopharyngeal carcinoma (NPC) CNE2 cells to xenografts in nude mice, and the mechanism may be related to down-regulation of Sp1.
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R739.63

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本文编号：1885797