实验性视网膜脱离复位后脑源性神经营养因子对视网膜保护作用的实验研究
发布时间:2018-05-31 03:09
本文选题:视网膜脱离 + 脑源性神经营养因子 ; 参考:《华中科技大学》2012年硕士论文
【摘要】:目的通过建立大鼠眼视网膜脱离(Retinal detachment,RD)模型,观察RD复位后采用向玻璃体腔注入脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophicfactor, BDNF)的给药方式,从光感受器细胞的凋亡,RD复位后视网膜形态学和视网膜细胞超微结构方面探讨BDNF对RD损伤后视网膜修复的影响,为采用神经营养因子抑制RD复位后细胞凋亡,促进视网膜功能恢复提供理论依据。 方法 1.取健康SD大鼠56只,通过在视网膜下注射透明质酸钠的方法建立RD模型,并观察视网膜自动复位的时间。 2.将56只大鼠随机分为四组,BDNF实验组、实验对照组、RD复位组和正常对照组,BDNF实验组、实验对照组在视网膜自动复位的当日分别在玻璃体腔注射BDNF(20μg/ml)10μl和生理盐水(normal saline, NS)10μl。 3.采用光镜和电镜观察RD复位后视网膜形态和视网膜细胞超微结构,检测BDNF对RD造成的视网膜变性的影响;采用原位缺口末端原位末端转移酶标记法(Terminal deoxynucleotidyl transferase mediated deoxyuridine triphosphatenick-end labeling,TUNEL)检测BDNF对RD复位后视网膜细胞凋亡的影响。 结果 1.视网膜自动复位的平均时间为31.3±3.5天。 2.光镜观察:与正常对照组相比,RD复位后视网膜整体厚度变薄,内核层,内外核层厚度变薄,尤以外核层明显,视锥视杆细胞层细胞稀疏,排列紊乱,外从状层明显变薄;神经节细胞层细胞数目变少,神经纤维层变薄。与实验对照组相比,BDNF实验组视网膜整体厚度较实验对照组厚,内外核层皆较厚,尤以外核层明显,光感受器细胞层排列更整齐,细胞密度较大,神经节细胞层细胞数目较多,排列较好。视网膜外核层厚度比较:正常组视网膜外核层厚度平均为39.446μm,与其余各组比较有统计学意义(P<0.05);BDNF实验组平均厚度为23.509μm,实验对照组平均厚度为13.496μm,BDNF实验组与实验对照组相比较有显著性差异(P<0.01)。视网膜内核层厚度比较:正常组视网膜内核层厚度平均为24.636μm,与其余各组相比有统计学意义(P<0.05);BDNF实验组平均厚度为21.166μm,实验对照组平均厚度为16.084μm,BDNF实验组与实验对照组相比较有显著性差异(P<0.01)。 3.电镜观察:与正常对照组相比,RD复位组视网膜各层损害都较严重,各层结构排列紊乱,空泡样变,内核层细胞核周间隙变大,核染色质疏松,核有溶解;神经节细胞核染色质疏松,纤维层神经节细胞轴突肿胀。与实验对照组相比,BDNF实验组内外节损害较轻、视细胞数较多、外核层较厚、视网膜结构和层次排列较好,视网膜各层变性较轻。 4. TUNEL观察:除正常对照组外,,BDNF实验组,实验对照组,RD复位组都能见到TUNEL阳性细胞,主要在视网膜内外核层,感光细胞层间也可见。实验对照组和RD复位对照组内外核层和光感受器细胞层TUNEL阳性细胞清晰可数,而BDNF实验组内外核层及感光细胞层间TUNEL阳性细胞较实验对照组少。 结论 1.RD复位后视网膜形态及视网膜细胞超微结构发生了改变。 2.RD复位后视网膜的视细胞有凋亡的存在。 3.外源性BDNF能抑制RD复位后视网膜细胞的凋亡,对视网膜脱离复位后视细胞损伤有一定的保护作用,为采用神经营养因子促进视网膜功能恢复提供新的理论依据。
[Abstract]:Objective To establish a model of retinal detachment ( RD ) in rats , and observe the effect of BDNF on retinal repair after RD reduction by injecting brain - derived neurotrophic factor ( BDNF ) into vitreous cavity after RD reduction .
method
1 . Using 56 healthy SD rats , the RD model was established by injecting sodium hyaluronate under the retina , and the time of auto - reduction of the retina was observed .
2 . Fifty - six rats were randomly divided into four groups : BDNF experimental group , experimental control group , RD reduction group and normal control group , BDNF group and experimental control group . BDNF ( 20 渭g / ml ) 10 渭l and normal saline ( NS ) 10 渭l were injected into vitreous cavity on the day of auto - reduction of retina .
3 . The retinal morphology and ultrastructure of retinal cells were observed by light microscope and electron microscope . The effects of BDNF on retinal degeneration caused by RD were detected .
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本文编号:1958049
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