MicroRNA-21对儿童中耳胆脂瘤细胞增殖和凋亡的调控作用

发布时间：2018-07-25 06:43

【摘要】：目的探讨MicroRNA-21(miR-21)及其靶基因第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)和程序性细胞死亡因子4(PDCD4)蛋白在儿童中耳胆脂瘤细胞增殖和凋亡中的调控作用。方法选取2013年8月至2015年3月儿童中耳胆脂瘤患者手术标本23例,提取并培养其中耳胆脂瘤角质细胞,分为实验组、阴性对照组和空白对照组,实验组以介导miR-21抑制体的慢病毒载体转染中耳胆脂瘤角质细胞,阴性对照组转染空慢病毒载体,空白对照组不进行处理,利用实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测各组细胞中miR-21和PTEN基因、PDCD4蛋白的表达,利用EdU和TUNEL法检测各组细胞的增殖和凋亡情况。结果实验组胆脂瘤角质细胞中miR-21表达显著低于空白对照组和阴性对照组(P0.05),PTEN基因和PDCD4蛋白的表达明显高于空白对照组和阴性对照组(P0.05),EdU阳性细胞显著低于阴性对照组和空白对照组(P0.05),TUNEL阳性细胞显著高于阴性对照组和空白对照组(P0.05)。结论 MiR-21可负性调控其靶基因PTEN和PDCD4的表达,miR-21抑制体可有效抑制儿童胆脂瘤角质细胞的增殖活性,促进细胞的凋亡。
[Abstract]:Objective to investigate the role of MicroRNA-21 (miR-21) and its target gene chromosome 10 deletion of phosphatase and tensin homologous gene (PTEN) and programmed cell death factor 4 (PDCD4) in the proliferation and apoptosis of middle ear cholesteatoma cells in children. Methods from August 2013 to March 2015, 23 children with middle ear cholesteatoma were collected and cultured. The keratinocytes were divided into three groups: experimental group, negative control group and blank control group. In experimental group, lentivirus vector mediated miR-21 inhibitor was transfected into keratinocytes of middle ear cholesteatoma, negative control group was transfected with empty lentivirus vector, blank control group was not treated. Real-time quantitative PCR (qRT-PCR) and Western blot were used to detect the expression of miR-21 and PTEN gene pPDCD4, and EdU and TUNEL methods were used to detect the proliferation and apoptosis of the cells. Results the expression of miR-21 in the keratinocytes of cholesteatoma in the experimental group was significantly lower than that in the blank control group and the negative control group (P0.05). The expression of PTEN gene and PDCD4 protein in the cholesteatoma keratinocytes in the experimental group was significantly higher than that in the blank control group and the negative control group (P0.05). The Tunel positive cells in the control group (P0.05) were significantly higher than those in the negative control group and the blank control group (P0.05). Conclusion MiR-21 can negatively regulate the expression of PTEN and PDCD4 in children cholesteatoma keratinocytes and can effectively inhibit the proliferation of keratinocytes and promote the apoptosis of children cholesteatoma keratinocytes.
【作者单位】： 郑州大学第一附属医院耳科;
【基金】：河南省教育厅科技攻关项目(13A320649)
【分类号】：R764.21

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：2142967