多模式Gjb2基因缺失诱导小鼠听力损伤的机制研究

发布时间：2021-10-21 13:30

　　第一部分时间依赖性Gjb2基因敲除模式诱导小鼠听力损伤的机制研究目的:研究在发育不同阶段敲除耳蜗Connexin26对小鼠听力及耳蜗支持细胞发育的影响。方法:将实验动物分为早期敲除组（P0 KD）、晚期敲除组（P8 KD）和对应的早期对照组（P0 Control）、晚期对照组（P8 Control）。运用Cx26^flox/flox小鼠与Rosa26-CreER小鼠杂交,构建TMX诱导敲除Gjb2基因的Cx26^flox/flox;Rosa26-CreER小鼠。分别在小鼠Corti隧道开放前（P0-P1）及Corti隧道开放后（P8-P9）连续两日给予小鼠他莫昔芬（Tamoxifen,TMX）皮下注射,Cx26^flox/flox;Rosa26-CreER作为敲除组,同窝 Cx26^flox/flox小鼠作为对照组。基底膜铺片免疫荧光染色及Western Blot检测Cx26敲除情况;在TMX注射后18天ABR检测听阈;树脂切片检测Corti器形态;扫描电镜检测Corti器空间结构;透射电镜检测Corti器... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：99 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图1.时间特异性Cx26敲除小鼠中耳蜗Cx26敲除情况及Cre阳性细胞计数

图 2. ABR 检测各组小鼠听力情况。P0 敲除组出现明显的全频听力损失。在 TMX 注射 18 天后，对各组小鼠行 ABR 检测其听阈，P0 敲除组表现为明显的全频听力损失。

35图 3. 仅在 Cx26 早期敲除组小鼠中出现明显的 Corti 器发育停滞。（A,B）分别显示 P0 及 P8 敲除组耳蜗切片的大体情况。（C-E）分别显示对照组小鼠顶中底回 Corti 器形态，图 D 中红线指示柱细胞连接头板与基底膜间的长度，蓝线指示第三排外毛细胞顶部至基底膜的长度。（F-H）分别显示 P0 敲除组顶中底回 Corti器形态，黑色箭头指示未开放的 Corti 隧道。（I-K）分别显示 P8 敲除组顶中底回 Corti器形态。（L-N）分别显示 P8 对照组顶中底回 Corti 器形态。（O）基底膜铺片测量各组柱细胞核间距离。（P）显示各组中柱细胞头板及第三排毛细胞顶部至基底膜的相对距离。（Q）显示各组中内外柱细胞细胞核之间的相对距离。


本文编号：3449078