PAR-2破坏变应性鼻炎上皮屏障功能及紧密连接蛋白表达的研究

发布时间：2022-02-08 17:03

　　目的:探讨变应性鼻炎（Allergic rhinitis,AR）患者鼻粘膜上皮蛋白酶激活受体-2（protease-activated receptors-2,PAR-2）对鼻粘膜上皮屏障功能的影响及与紧密连接蛋白（tight junctions,TJs）表达的相关性。探究AR的发病机制,为其治疗和预防提供理论依据。方法:1、检测AR患者鼻黏膜组织（n=18）和健康对照组鼻黏膜组织（n=26）PAR-2和紧密连接蛋白Claudin-1,-3,-4,-7,-8,-9,-12,-18,ZO-1,ZO-2,tricellulin,Occludin,JAM-1表达情况。采用免疫组化（IHC）、免疫印迹（Western blot）、实时荧光定量PCR（RT-qPCR）方法检测各目的基因表达,并进行PAR-2与TJs mRNA表达的相关性分析。2、取鼻粘膜组织进行鼻粘膜上皮细胞原代培养,用粉尘螨变应原Der p1刺激细胞,同时分别用PAR-2激动剂和抑制剂刺激细胞后,收集细胞采用RT-qPCR方法检测PAR-2和TJs的表达,并进行FD4浓度测定,评价上皮细胞渗透性。结果:1、PAR-2与TJs在... 

【文章来源】：南昌大学江西省211工程院校

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

AR患者鼻粘膜上皮中TJs和PAR-2表达免疫组化结果

图 2.2 AR 患者鼻粘膜上皮中 TJs 和 PAR-2 表达免疫组化结果半定量分析色代表正常对照组，黑色代表 AR 组。TJs 蛋白 Claudin-1,-3,-7,-12、JAM-A、Occlud-1 在 AR 患者鼻粘膜上皮表达较正常对照组低，在 AR 患者鼻粘膜上皮细胞中 PAR-达较对照组高，差异均具有统计学意义,其中*P<0.05，**P<0.01。2.2 AR 患者鼻粘膜上皮中 TJs 和 PAR-2 表达免疫印迹结果分析使用免疫印迹法对各 TJs 蛋白和 PAR-2 蛋白进行定量分析，对 WB 图片扫描，灰度分析结果如图 2.3 - 2.4 所示：Claudin-1,-3,-7,-12、JAM-A、Occlud-1 在 AR 组表达下降，在 AR 患者鼻粘膜上皮细胞中 PAR-2 表达较对照组异具有统计学差异（p < 0.05）。

图 2.2 AR 患者鼻粘膜上皮中 TJs 和 PAR-2 表达免疫组化结果半定量分析蓝色代表正常对照组，黑色代表 AR 组。TJs 蛋白 Claudin-1,-3,-7,-12、JAM-A、Occludin、ZO-1 在 AR 患者鼻粘膜上皮表达较正常对照组低，在 AR 患者鼻粘膜上皮细胞中 PAR-2 表达较对照组高，差异均具有统计学意义,其中*P<0.05，**P<0.01。2.2.2 AR 患者鼻粘膜上皮中 TJs 和 PAR-2 表达免疫印迹结果分析使用免疫印迹法对各 TJs 蛋白和 PAR-2 蛋白进行定量分析，对 WB 图片进行扫描，灰度分析结果如图 2.3 - 2.4 所示：Claudin-1,-3,-7,-12、JAM-A、Occludin、ZO-1 在 AR 组表达下降，在 AR 患者鼻粘膜上皮细胞中 PAR-2 表达较对照组高,差异具有统计学差异（p < 0.05）。


本文编号：3615421