新型光遗传学工具Channelrhodopsin-XXM2.0和CatCh2.0恢复视觉功能的可行性分析

发布时间：2022-07-13 15:12

　　目的探讨新型光遗传学工具Channelrhodopsin-XXM2.0 （XXM2.0）、Channelrhodopsin-PsCatCh2.0 （PsCatCh2.0）的光敏感性及动力学特征,分析其是否可用于光遗传学视觉功能的恢复。方法通过分子生物学技术将XXM2.0和PsCatCh2.0的基因片段连接到包含抗氨苄青霉素筛选基因和报告基因的载体pCIG （c）-msFoxn3上,形成新质粒pCIG （c）-msFoxn3-XXM2.0、pCIG （c）-msFoxn3-PsCatCh2.0。将构建的新质粒转染到HEK 293T细胞上,用HEKA膜片钳系统行全细胞模式记录对光反应。在2.7×1016、4.7× 1015、6.4×1014 photons/ （cm2·s）的光强下记录电流大小;在2.7×1016 photons/ （cm2·s）光强下刺激XXM2.0、PsCatCh2.0并让其充分恢复,在Clampfit 10.6软件中分析开放和关闭时间常数;在相同光强下,设置2～ 32 Hz的光脉冲刺激,记录XXM2.0、PsCatCh2.0的响应情况,并在重复光刺激后间隔4000 m... 

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【参考文献】：
期刊论文
[1]光遗传学在视网膜色素变性治疗中的研究进展[J]. 张轶,黄熙,张军军.  中华眼底病杂志. 2018 (06)
[2]光遗传学技术及其在视网膜变性性疾病治疗中的应用[J]. 沈雨濛,邢怡桥,沈吟.  中华眼底病杂志. 2016 (03)



本文编号：3660269