Mycn基因上皮特异性敲除小鼠角膜病变及其部分机制的初探

发布时间：2022-09-17 12:33

　　由角膜病引发的角膜混浊是致盲的重要原因之一。Mycn是Myc原癌基因家族的一员,主要参与细胞增殖、凋亡、分化等多种细胞过程。国内外对Mycn基因的研究重点围绕肿瘤的发生。在先前的研究中,本实验室使用化学诱变剂乙烷基亚硝基脲（ENU）诱导小鼠突变获得一例Mycn基因点突变角膜混浊小鼠模型。随后从美国杰克逊实验室引入MycntmlPsk/J（Mycnflox/+）鼠以及广泛表达Cre重组酶的EIIa-Cre工具鼠,进一步确定了Mycn基因突变与角膜混浊的相关性。研究发现部分角膜混浊小鼠在初生时呈眼睑开放表型,故将角膜混浊小鼠分为初生时眼睑闭合型及开放型两种,并已对眼睑开放型角膜病的发生原因进行研究。本研究主要目的是确定Mycn基因上皮特异性敲除是否也可以获得类似的角膜病表型并进一步对其中眼睑闭合型角膜病的发生机制进行初探。1.Mycn基因上皮特异性敲除角膜病小鼠的获得将从美国杰克逊实验室引入的Mycntm1Psk/J(Mycnflox/+小鼠以及皮肤特异性表达Cre重组酶的K14-Cre工具鼠两种小鼠配种,最终获得上皮特异性Mycn基因敲除小鼠（Mycn-/+）,该小鼠出生后表现为角膜混浊... 

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
符号说明
文献综述
    一 MYC的研究进展
        1 MYC的发现
        2 MYC蛋白结构及功能
        3 MYC的生物学功能
            3.1 MYC与细胞分化
            3.2 MYC与细胞周期
            3.3 MYC与细胞凋亡
            3.4 MYC与细胞代谢
        4 Myc家族基因
            4.1 c-Myc
            4.2 l-Myc
            4.3 Mycn
                4.3.1 Mycn与肿瘤
                4.3.2 Mycn在发育中的研究
    二 角膜与角膜病
        1 角膜的结构与功能
            1.1 上皮细胞层(Epithelium)
            1.2 前弹性层(Bowman's membrane)
            1.3 基质层(Stroma)
            1.4 后弹性层(Descemet's membrane)
            1.5 内皮层(Endothelium)
        2 角膜病
            2.1 peters'异常(PA)
            2.2 先天性内皮营养不良(CHED)
            2.3 后部多形性营养不良(PPMD)
    三 晶状体泡及角膜的发生
        1 胚眼的发生概况
        2 与晶状体泡脱离相关的部分基因
            2.1 E-cadherin、N-cadherin (E-和N-钙粘基因)
            2.2 FoxE3
            2.3 AP-2α
            2.4 Pax6
            2.5 c-Myc
    四 本研究目的与意义
实验部分
    第一章 Mycn基因上皮特异性敲除角膜病小鼠的获得
        1 材料与方法
            1.1 实验材料
                1.1.1 实验动物及饲养条件
                1.1.2 主要仪器和设备
                1.1.3 主要试剂
            1.2 实验方法
                1.2.1 上皮特异性Mycn基因敲除小鼠的获得
                1.2.2 基因型鉴定
        2 结果
            2.1 Mycn基因上皮特异性敲除小鼠繁殖与分型
            2.2 Mycn~(-/+)小鼠眼部表型
            2.3 遗传实验统计结果
        3 讨论
    第二章 Mycn~(-/+)小鼠角膜病理组织学观察
        1 材料与方法
            1.1 实验材料
                1.1.1 实验动物及饲养条件
                1.1.2 主要仪器和设备
                1.1.3 主要试剂
            1.2 实验方法
                1.2.1 小鼠获得
                1.2.2 小鼠角膜组织HE染色
                1.2.3 小鼠角膜组织免疫组织化学染色
        2 结果
            2.1 小鼠眼球HE染色结果
            2.2 免疫组织化学染色结果
                2.2.1 细胞角蛋白K12、K14及K10免疫组化结果
                2.2.2 整合素亚单位beta4免疫组化结果
        3 讨论
    第三章 Mycn~(-/+)小鼠晶状体泡分离缺陷及其机制的研究
        1 材料与方法
            1.1 实验材料
                1.1.1 实验动物及饲养条件
                1.1.2 主要仪器和设备
                1.1.3 主要试剂
            1.2 实验方法
                1.2.1 胚胎期小鼠的获得
                1.2.2 小鼠胚胎眼免疫组织化学分析
        2 结果
            2.1 HE染色结果
            2.2 免疫组织化学染色结果
                2.2.1 E-cadherin免疫组化结果
                2.2.2 N-cadherin免疫组化结果
                2.2.3 FOXE3免疫组化结果
        3 讨论
全文总结
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]Map3k1调控小鼠眼睑闭合的研究进展[J]. 吴刘成,邵义祥.  动物学杂志. 2011(03)

硕士论文
[1]Mycn突变角膜混浊小鼠角膜病变特点及机制的研究[D]. 漆重阳.扬州大学 2019
[2]Mycn基因敲除引起小鼠角膜混浊及其机制的初步研究[D]. 陈瑞.扬州大学 2019
[3]角膜混浊小鼠模型获得及其分子基础研究[D]. 倪俊达.扬州大学 2015



本文编号：3679231