放射性肌肉纤维化大鼠模型的骨骼肌卫星细胞的提取与鉴定
发布时间:2022-12-11 05:10
鼻咽癌推荐的首选临床医疗方式是放疗。但大约24.34%的鼻咽癌病人在接受根治性的放疗疗法后,出现张口困难、吞咽困难、颈部僵硬和疼痛以及肩功能失调等放射性肌肉纤维化(Radiation induced muscle fibrosis,RIF)症状。RIF可以引起骨骼肌损害和纤维化并存,将深重影响生活质量,甚至危及患者生命。在骨骼肌损伤以后的肌肉再生,通常由骨骼肌卫星细胞(SCs)介导。SCs的重新激活可以应对肌肉损伤,增殖并分化为新的肌肉细胞,迁移到受伤部位,来修补受损的肌肉,或维持干细胞库的稳态。放射性肌肉纤维化现有的治疗方法有皮质类固醇激素、维生素E、己酮可可碱、超氧化物歧化酶、高压氧疗等,但疗效不甚理想。目前的临床治疗不能有效或完全预防放射后肌肉纤维化的发生,因此依然是一个重要的临床问题。RIF确切的病理生理学尚不完全清楚,需要动物模型来模拟临床相关性并探索良好的治疗方法。本研究目的:通过1.90Gy放疗构建大鼠放射性肌肉纤维化模型;2.分离提取并鉴定大鼠骨骼肌卫星细胞;3.揭示大鼠骨骼肌卫星细胞形成参与90Gy放疗形成大鼠放射性肌肉纤维化的形成,探讨放射性肌肉纤维化形成的新机制,...
【文章页数】:66 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
Abstract
主要英文缩略语索引
第1章 绪论
1.1 文献综述
1.1.1 放射线损伤
1.1.2 放射线损伤的分子机制:放射线诱导直接或者间接 DNA 损伤
1.1.3 放射线损伤的细胞学机制
1.1.4 国内外研究现状
1.1.5 本课题研究的内容
第2章 材料与方法
2.1 实验材料
2.2 实验仪器
2.3 药品与试剂的配置
2.4 实验方法
2.4.1 动物分组与处理
2.4.2 动物麻醉与处死
2.4.3 组织取材与保存
2.4.4 细胞提取
2.4.5 组织石蜡包埋与切片
2.4.6 马松染色检测肌肉组织纤维化程度
2.4.7 肌肉组织 HE 染色观察肌肉组织病理形态学改变
2.4.8 组织免疫荧光染色
2.4.9 组织TUNEL染色
2.4.10 细胞的增殖、分化与细胞免疫荧光染色
2.4.11 统计学处理
第3章 结果
3.1 大鼠一般情况
3.2 骨骼肌形态学变化
3.3 肌肉组织TUNEL染色检测凋亡
3.4 放疗后大鼠肌肉的超微结构
3.5 肌肉组织Pax7基因表达
3.6 SCs的鉴定
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
攻读硕士期间发表的论文
致谢
本文编号:3718199
【文章页数】:66 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
Abstract
主要英文缩略语索引
第1章 绪论
1.1 文献综述
1.1.1 放射线损伤
1.1.2 放射线损伤的分子机制:放射线诱导直接或者间接 DNA 损伤
1.1.3 放射线损伤的细胞学机制
1.1.4 国内外研究现状
1.1.5 本课题研究的内容
第2章 材料与方法
2.1 实验材料
2.2 实验仪器
2.3 药品与试剂的配置
2.4 实验方法
2.4.1 动物分组与处理
2.4.2 动物麻醉与处死
2.4.3 组织取材与保存
2.4.4 细胞提取
2.4.5 组织石蜡包埋与切片
2.4.6 马松染色检测肌肉组织纤维化程度
2.4.7 肌肉组织 HE 染色观察肌肉组织病理形态学改变
2.4.8 组织免疫荧光染色
2.4.9 组织TUNEL染色
2.4.10 细胞的增殖、分化与细胞免疫荧光染色
2.4.11 统计学处理
第3章 结果
3.1 大鼠一般情况
3.2 骨骼肌形态学变化
3.3 肌肉组织TUNEL染色检测凋亡
3.4 放疗后大鼠肌肉的超微结构
3.5 肌肉组织Pax7基因表达
3.6 SCs的鉴定
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
攻读硕士期间发表的论文
致谢
本文编号:3718199
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