线粒体靶向性抗氧化肽SS-31对大鼠慢性高眼压模型视神经损伤的保护作用

发布时间：2017-05-18 18:20

  本文关键词：线粒体靶向性抗氧化肽SS-31对大鼠慢性高眼压模型视神经损伤的保护作用，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:研究线粒体靶向性抗氧化肽SS-31对SD大鼠慢性高眼压模型视神经损伤的保护作用及可能的机制,为青光眼视神经保护提供实验依据。方法:将45只成年雄性无眼病清洁级SD大鼠随机分为五组,A组:青光眼组、B组:青光眼+生理盐水组、C组:青光眼+SS-31干预组、D组:正常组、E组:正常组+SS-31组,每组9只。A、B、C组每只SD大鼠右眼接受10μm聚苯乙烯微球前房注射5μL,前四周每周一次,四周后每两周一次至第六周,建立慢性高眼压模型。第一次前房注射聚苯乙烯微球术后第五天使用Tonolab眼压计测量大鼠眼压,其后每三天测量一次。建立慢性高眼压模型成功之后,每天予以C、E组大鼠按SS-31(3mg/kg)腹腔注射六周,而B组予以同等体积的0.9%生理盐水腹腔注射六周,六周时行视网膜电图(electroretinogram,ERG)和闪光视觉诱发电位(Flash-visual evoked potential,F-VEP)检查,其后处死大鼠取右眼球分别制作石蜡切片、提取视网膜蛋白。HE染色观察各组距视乳头1.5mm处的视网膜神经节细胞复合体厚度(ganglion cell complex,GCC)、TUNEL法检测视网膜神经节细胞层(ganglion cell layer,GCL)细胞凋亡率(apoptosis index,AI)、western blot印迹法检测视网膜胞质细胞色素c(cytochrome c,cyt c)蛋白表达情况、免疫组化及western bolt印迹法检测视网膜B细胞淋巴瘤-2蛋白(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、BCL-2相关X蛋白(BCL2-associated X protein,Bax)表达情况。结果:(1)A、B、C组大鼠接受聚苯乙烯微球前房注射后眼压较未前房注射大鼠(即D组和E组)明显升高(P0.05),A、B、C组组间差异无统计学意义,D、E组组间差异无统计学意义。(2)ERG检查记录各组大鼠a波、b波振幅值,F-VEP检查记录N1-P1振幅值。发现A组a波、b波振幅值及N1-P1振幅值较D组明显降低(P0.05),C组大鼠经SS-31干预后,a波、b波振幅值及N1-P1振幅值较A组有所回升,而A与B组间,D与E组间无统计学意义。(3)HE染色发现,与D组大鼠距视乳头1.5mm处的视网膜GCC厚度相比,A组大鼠距视乳头1.5mm处的视网膜GCC厚度明显变薄(P0.05),C组大鼠经SS-31干预后GCC厚度较A组明显增厚,而A与B组间,D与E组间无统计学意义。(4)TUNEL检测发现A组大鼠视网膜GCL细胞AI明显高于D组(P0.05),C组大鼠经SS-31干预后视网膜GCL细胞AI明显低于A组,而A与B组间,D与E组间无统计学意义。(5)Western Blot印迹检测发现A组视网膜胞质cyt c表达较D组显著提高(P0.05),C组大鼠经SS-31干预后视网膜胞质cyt c表达明显低于A组,而A与B组间,D与E组间无统计学意义。(6)Envision免疫组化和Western Blot印迹法定性、定量检测视网膜Bax、Bcl-2的表达情况,发现A组大鼠视网膜Bax表达明显高于D组(P0.05),同时Bcl-2表达明显低于D组(P0.05),C组经SS-31干预后,与A组相比,Bax表达降低,Bcl-2表达增加,而A与B组间,D与E组间无统计学意义。结论:SS-31能抑制线粒体释放cyt c到胞质中,增加Bcl-2表达的同时降低Bax表达,抑制视网膜GCL细胞凋亡,对大鼠视网膜起到保护作用,同时视觉电生理检查发现SS-31对大鼠视功能也具有保护作用。因此,本实验从形态学、功能学上证实了SS-31对高眼压模型视神经损伤具有一定的保护作用。
【关键词】：线粒体靶向性抗氧化肽SS-31 青光眼 视神经保护 氧化应激
【学位授予单位】：西南医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R775;R-332
【目录】：

• 中文摘要3-6
• 英文摘要6-10
• 前言10-14
• 材料与方法14-25
• 结果25-33
• 讨论33-41
• 结论41-42
• 参考文献42-51
• 英汉缩略词对照表51-53
• 致谢53-55
• 细胞外基质重塑在原发性开角型青光眼的作用及研究进展(综述)55-67
• 参考文献62-67

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