绿原酸对小鼠变应性鼻炎的作用及其机制研究

发布时间：2017-05-19 13:20

  本文关键词：绿原酸对小鼠变应性鼻炎的作用及其机制研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)即过敏性鼻炎,是指在外界环境和基因相互影响下,过敏体质个体与特异性抗原接触后,导致由IgE介导的炎性介质大量释放,诱导鼻黏膜多种免疫细胞因子浸润,多种活性物质参与的非感染性变态疾病。常表现为鼻痒、鼻塞和喷嚏等临床症状,严重者伴有头痛、头晕、耳鸣等症状。现代研究表明,AR具有发病范围广,发病率高的特点。绿原酸(Chlorogenic acid)即咖啡鞣酸,研究显示绿原酸具有抑菌、抗炎和抗病毒的活性,能够通过降低胆固醇的含量达到保护心血管的作用。同时还证实绿原酸对消化系统、免疫系统、内分泌系统都具有调节功能。但是绿原酸对于过敏性鼻炎的治疗未见报道。本研究旨在利用动物模型,研究绿原酸对过敏性鼻炎的保护作用。主要分为以下两个部分,一是采用小鼠腹腔注射抗原佐剂混悬液0.2ml(含OVA 20μg,Al(OH)32mg),隔天1次,共7次进行全身致敏后分别用5%OVA或10%OVA生理盐水溶液滴鼻,每侧鼻孔10μl,每日1次,诱导过敏性鼻炎模型,通过对小鼠的行为学、鼻腔分泌物、脏器指数、血清中组胺、IgE含量等相关评价指标进行检测,进而评价建立小鼠AR模型的最适OVA滴鼻浓度;二是采用10%OVA生理盐水溶液滴鼻建立小鼠变应性鼻炎模型。观察连续给予不同剂量的绿原酸(50、100、200 mg/kg),观察AR小鼠行为学的变化,小鼠鼻腔灌洗液及血清中组胺、IgE及细胞因子含量水平变化及小鼠的鼻黏膜组织中生化指标变化。进而探讨出绿原酸对于OVA诱导的过敏性鼻炎是否具有保护作用及其相关机制。实验方案:1、OVA诱导小鼠过敏性鼻炎模型的建立(1)观察小鼠的行为学变化情况,记录小鼠抓鼻和喷嚏的次数;(2)检测小鼠鼻腔分泌物重量;(3)测定小鼠血清中组胺、IgE的水平;2、绿原酸对OVA诱导的小鼠过敏性鼻炎的影响(1)测定OVA诱导过敏性鼻炎小鼠的行为学的变化情况,记录小鼠抓鼻和喷嚏的次数;(2)测定ova诱导过敏性鼻炎小鼠的鼻腔分泌物重量;(3)测定ova诱导过敏性鼻炎小鼠的脏器指数;(4)测定ova诱导过敏性鼻炎小鼠的鼻腔灌洗液中il-4、ifn-γ的水平;(5)测定ova诱导过敏性鼻炎小鼠的血清中组胺、ige及细胞因子的水平;(6)测定ova诱导过敏性鼻炎小鼠的鼻黏膜组织中细胞因子mrna的表达。实验结果:1、ova诱导小鼠过敏性鼻炎模型的建立(1)与正常组比较,随着ova滴鼻次数的增加5%ova模型组和10%ova模型组小鼠喷嚏和抓鼻次数增加。但10%ova模型组小鼠喷嚏和抓鼻次数显著增加,具有统计学意义(p0.001);(2)10%ova模型组在7-10天内鼻腔分泌物重量持续增加,且明显高于正常组(p0.05)。而5%ova模型组鼻腔分泌物重量具有增加趋势,第9、第10天明显高于正常组(p0.05);(3)与正常组比较,10%ova模型组小鼠血清中组胺和ige的含量显著增高,具有统计学差异(p0.001)。5%ova模型组小鼠血清中组胺含量增高,具有统计学意义(p0.05),但小鼠血清中ige的含量具有升高趋势,无统计学意义(p0.05)。2.绿原酸对ova诱导的小鼠过敏性鼻炎的影响(1)绿原酸低、中、高剂量组(50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg)ar小鼠的喷嚏和抓鼻次数明显减少,与模型组相比,具有统计学差异(p0.05);(2)与模型组相比,绿原酸高剂量组(200mg/kg)鼻腔分泌物重量显著减少,具有统计学差异(p0.05)。绿原酸低、中剂量组(50mg/kg、100mg/kg)ar小鼠的鼻腔分泌物重量无统计学差异(p0.05);(3)与模型组相比,绿原酸低、中、高剂量组(50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg)中的脾脏指数显著减少,胸腺指数显著增加,具有统计学差异(p0.05);(4)与模型组相比,绿原酸中、高剂量组(100mg/kg、200mg/kg)小鼠鼻腔灌洗液ifn-γ的含量明显上升,il-4的含量明显降低,具有统计学差异(p0.01)。绿原酸低剂量组(50mg/kg)小鼠鼻腔灌洗液ifn-γ的含量无明显变化,无统计学差异(p0.05);il-4的含量降低,与模型组相比,具有统计学差异(p0.05);(5)与模型组相比,绿原酸低、中、高剂量组(50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg)可以显著降低小鼠血清组胺和IgE的含量,具有统计学差异(p0.05);(6)与模型组相比,绿原酸中、高剂量组(100mg/kg、200mg/kg)可以升高小鼠血清IFN-γ的含量,降低小鼠血清IL-4、IL-5和IL-10的含量,同时IFN-γ/IL-4升高,具有统计学差异(P0.05);绿原酸低剂量组(50mg/kg)可以显著降低小鼠血清IL-4的含量,具有统计学差异(p0.05),对小鼠血清IFN-γ、IL-5和IL-10的含量无显著变化,无统计学意义(p0.05);(7)与模型组相比,绿原酸中、高剂量组(100mg/kg、200mg/kg)可以显著降低IL-4、IL-5和IL-10的mRNA相对表达量,升高IFN-γ的m RNA相对表达量,具有统计学差异(P0.05);绿原酸低剂量组(50mg/kg)可以显著降低IL-4、IL-5的mRNA相对表达量,升高IFN-γ的mRNA相对表达量,具有统计学差异(p0.05),对小鼠IL-10的mRNA相对表达量无显著变化,无统计学意义(p0.05)。实验结论:1.OVA能够诱导AR小鼠出现急性期的相关症状,OVA的最佳浓度为10%。2.绿原酸可减少AR小鼠喷嚏及抓鼻次数,减少小鼠鼻腔分泌物量,明显降低AR小鼠的脾脏指数,增加胸腺指数,增加小鼠鼻腔灌洗液IFN-γ的含量,降低小鼠鼻腔灌洗液IL-4的含量,显著降低AR小鼠血清中组胺、IgE、IL-4、IL-5和IL-10的含量,增加IFN-γ的含量,升高IFN-γ/IL-4的值,下调AR小鼠鼻黏膜组织IL-4、IL-5和IL-10的mRNA的表达,上调IFN-γmRNA的表达。
【关键词】：绿原酸 变应性鼻炎 组胺 IgE 细胞因子 PCR
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R765.21
【目录】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-15
• 第1章 前言15-32
• 1.1 变应性鼻炎概述15
• 1.2 AR的病因研究15-16
• 1.2.1 遗传因素15-16
• 1.2.2 过敏原诱发因素16
• 1.2.3 其他因素16
• 1.3 AR的发病机制的研究进展16-23
• 1.3.1 AR与炎症介质关系学说17-19
• 1.3.2 Th1和Th2细胞平衡学说19-20
• 1.3.3 AR与IgE及其受体关系学说20-21
• 1.3.4 AR与Th17相关细胞因子学说21-22
• 1.3.5 AR与Th9细胞学说22
• 1.3.6 AR与IL-33关系学说22-23
• 1.4 AR的治疗研究进展23-26
• 1.4.1 避免接触变应原23
• 1.4.2 药物治疗23-25
• 1.4.3 免疫治疗25-26
• 1.4.4 手术治疗26
• 1.5 AR动物模型的研究进展26-27
• 1.5.1 实验动物的选择26
• 1.5.2 变应原的选择26-27
• 1.6 绿原酸的研究进展27-32
• 1.6.1 绿原酸的抗菌作用28
• 1.6.2 绿原酸的抗病毒作用28
• 1.6.3 绿原酸的抗氧化作用28-29
• 1.6.4 绿原酸的抗肿瘤作用29
• 1.6.5 绿原酸的心血管保护作用29
• 1.6.6 绿原酸的免疫调节作用29-30
• 1.6.7 绿原酸的抗肝纤维化作用30
• 1.6.8 绿原酸的调节糖、脂代谢作用30
• 1.6.9 绿原酸的抗乳腺炎作用30-32
• 第2章 OVA诱导的小鼠过敏性鼻炎模型的建立32-38
• 2.1 材料32
• 2.1.1 实验动物32
• 2.1.2 试剂及药物32
• 2.1.3 主要仪器32
• 2.2 方法32-34
• 2.2.1 造模方法32-33
• 2.2.2 分组与给药33
• 2.2.3 样品收集33
• 2.2.4 指标观察33-34
• 2.2.5 统计学分析34
• 2.3 结果34-36
• 2.3.1 不同滴鼻剂量OVA对小鼠的行为学指标的影响34-35
• 2.3.2 不同滴鼻剂量OVA对小鼠鼻腔分泌物的影响35-36
• 2.3.3 不同滴鼻剂量OVA对小鼠血清中组胺、IgE的影响36
• 2.4 讨论36-38
• 第3章 绿原酸对OVA诱导的小鼠过敏性鼻炎的影响38-53
• 3.1 材料38-39
• 3.1.1 实验动物38
• 3.1.2 试剂及药物38-39
• 3.1.3 重要仪器39
• 3.2 方法39-43
• 3.2.1 造模方法39-40
• 3.2.2 分组与给药40
• 3.2.3 样品收集40
• 3.2.4. 检测AR小鼠行为学40
• 3.2.5 检测AR小鼠鼻腔分泌物的重量40
• 3.2.6 观察AR小鼠脏器指数40-41
• 3.2.7 检测AR小鼠鼻腔灌洗液中IL-4、IFN_(-γ)的水平41
• 3.2.8 检测AR小鼠血清中组胺、IgE及IL-4、IFN_(-γ)、IL-5 和IL-10的水平41
• 3.2.9 检测AR小鼠鼻黏膜组织中IL-4、IFN_(-γ)、IL-5 和IL-10mRNA的水平41-43
• 3.3 统计学分析43
• 3.4 结果43-50
• 3.4.1 绿原酸对AR小鼠行为学影响43-44
• 3.4.2 绿原酸对AR小鼠鼻腔分泌物重量的影响44-45
• 3.4.3 绿原酸对AR小鼠脏器指数的影响45-47
• 3.4.4 绿原酸对小鼠鼻腔灌洗液中IL-4、IFN_(-γ)含量的影响47
• 3.4.5 绿原酸对小鼠血清组胺和IgE及IL-4、IFN_(-γ)、IL-5 和IL-10的含量的影响47-49
• 3.4.6 绿原酸对小鼠鼻黏膜组织IL-4mRNA、IFN_(-γ) mRNA、IL-5mRNA和IL-10 mRNA表达的影响49-50
• 3.5 讨论50-53
• 结论53-54
• 参考文献54-64
• 作者简介及在学期间所取得的科研成果64-65
• 致谢65

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