内质网应激在氧化低密度脂蛋白诱导的人RPE细胞凋亡中的作用
发布时间:2023-04-25 21:46
目的:观察内质网应激(ERS)在氧化低密度脂蛋白(OxLDL)诱导的人视网膜色素上皮(RPE)细胞凋亡中的作用。方法:人RPE细胞系ARPE19采用低糖DMEM培养基和10%胎牛血清进行常规培养。实验分为3组:对照组(常规培养的ARPE19)、OxLDL组(加入5、10、25、50、100μg/mL OxLDL)和LDL组(加入5、10、25、50、100μg/mL LDL)培养24h。分别采用细胞计数试剂盒(CCK8)检测各组细胞活性,流式细胞仪检测凋亡比例,蛋白质印迹(Western blotting)检测ERS相关蛋白及凋亡相关酶的表达。激光共聚焦显微镜观察人RPE细胞吞噬红色荧光探针Dil标记的氧化低密度脂蛋白(Dil-OxLDL)情况。结果:CCK8结果显示:对照组细胞存活率为(100±5.637)%,加入5、10、25、50、100μg/mL OxLDL后细胞活力分别为(105.298±9.395)%、(97.106±5.417)%、(77.015±4.055)%、(67.613±3.853)%和(43.872±9.532)%(P<0.05);加入5、10、25、50...
【文章页数】:5 页
【文章目录】:
0引言
1材料和方法
1.1材料
1.2方法
1.2.1细胞培养
1.2.2 RPE细胞吞噬检测
1.2.3实验分组和细胞活力测定
1.2.4 Annexin V-FITC/PI 双染色法检测细胞凋亡
1.2.5 Western blotting分析
2结果
2.1 RPE细胞吞噬OxLDL情况
2.2 CCK8检测细胞活力结果
2.3 Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡情况
2.4 Western blotting检测ERS相关蛋白表达结果
3讨论
本文编号:3801122
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0引言
1材料和方法
1.1材料
1.2方法
1.2.1细胞培养
1.2.2 RPE细胞吞噬检测
1.2.3实验分组和细胞活力测定
1.2.4 Annexin V-FITC/PI 双染色法检测细胞凋亡
1.2.5 Western blotting分析
2结果
2.1 RPE细胞吞噬OxLDL情况
2.2 CCK8检测细胞活力结果
2.3 Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡情况
2.4 Western blotting检测ERS相关蛋白表达结果
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