Garcinone抑制鼻咽癌细胞生长及作用机制的体外研究

发布时间：2017-06-15 17:09

  本文关键词：Garcinone抑制鼻咽癌细胞生长及作用机制的体外研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：鼻咽癌是常见的头颈部恶性肿瘤.放疗和化疗是对鼻咽癌的标准治疗方法。Garcinone是从岭南山竹子分离出来的天然产物,是一种氧杂蒽酮的衍生物,已经证实对某些癌症类型具有潜在的细胞毒性作用。然而,对鼻咽癌细胞的作用机制研究以及在这方面的作用仍然不清楚。在本次研究中,我们第一次发现与对照相比,Garcinone显著的抑制人鼻咽癌细胞株CNE 1,CNE2,HK1,和HONE1的细胞活力.这种抑制以时间很浓度依赖的形式.然后,流式细胞计数法对细胞周期的分析,我们观察到Garcinone阻滞细胞周期在S期.用10μM高浓度的Garcinone处理,细胞显示出坏死细胞形态的变化,包括细胞肿胀,粗面内质网脱颗粒,内质网膨胀,线粒体肿胀,以及空泡变性.最后,我们发现Garcinone激发了ATR和4E-BP1的表达水平,然而有效的抑制了Cyclin B1, Cyclin D1, Cyclin E2, cdc2, CDK7,和Stat3的表达水平.总之,Garcinone能够在体外抑制鼻咽癌细胞,表明Garcinone有可能成为对鼻咽癌细胞控制的一种新型药物.目的：本课题针对Garcinone,一种源于山竹的一种提取物单体,研究其对鼻咽癌细胞生长增殖的影响,探寻鼻咽癌治疗的新方法。方法：1 通过MTS方法测定天然产物单体Garcinone对4株鼻咽癌细胞株(CNE1, CNE2, HK1, HONE1)增殖的影响。2 应用细胞周期以及凋亡检测方法研究天然产物单体Garcinone对4株鼻咽癌细胞株生存的影响；3 应用Western Blot方法检测Garcinone对4株鼻咽癌细胞株周期蛋白、凋亡、自噬蛋白表达的影响和可能的信号通路。4运用平板克隆形成实验检测Garcinone对4株鼻咽癌细胞株作用后的克隆形成能力的改变；5 采用电镜进一步检测细胞内细胞器在Garcinone作用下的改变。结果：细胞增殖实验结果显示,经过Garcinone处理4株鼻咽癌细胞株后,抑制细胞的增殖,其抑制作用呈浓度和时间依赖关系。因此选取这4株细胞进行下一步实验,Garcinone处理4株鼻咽癌细胞株,经流式细胞仪进行周期分析,加药组细胞随着时间的延长以及浓度的增加S/G2期受阻制的变化较为明显,但是凋亡实验结果显示加药组与对照组无明显变化。经过Garcinone处理这4株鼻咽癌细胞株后收取蛋白,进行Western Blot检测。结果显示,经天然产物Garcinone处理后的细胞株周期蛋白表达明显改变。平板克隆实验显示对照组克隆率比较高,而加药组随着浓度的加大克隆率降低的趋势比较明显。最后用电镜观察细胞内结构的改变,电镜下看到加药组与对照组相比,加药组线粒体肿胀较为明显,呈时间浓度依赖,且能看到自噬小体的存在。结论：天然产物Garcinone能有效地抑制鼻咽癌细胞的增殖,阻滞细胞在S期；信号通路研究证明STAT3发挥重要作用；Garcinone能有效的使鼻咽癌细胞克隆率降低；此外Garcinone作用于鼻咽癌细胞株后,能使细胞内出现空泡变性结构以及自噬小体,从而诱导细胞凋亡。
【关键词】：Garcinone 鼻咽癌细胞 细胞周期 细胞器 天然产物
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R739.63
【目录】：

• 中英文缩写对照表5-7
• 摘要7-10
• ABSTRACT10-13
• 前言13-16
• 一 实验材料与方法16-34
• 1 实验材料16-23
• 2 实验方法23-34
• 二 实验结果34-55
• 1 Garcinone对鼻咽癌细胞株的抑制作用34-38
• 2 Garcinone体外抑制NPC细胞的克隆形成38-40
• 3 Garcinone对鼻咽癌细胞凋亡调控作用40-41
• 4 Garcinone对鼻咽癌细胞周期调控作用41-46
• 5 Garcinone对鼻咽癌细胞周期蛋白的调控作用46-48
• 6 鼻咽癌细胞在Garcinone作用下超微结构的改变48-51
• 7 Garcinone作用后鼻咽癌细胞自噬蛋白表达的初步分析51-52
• 8 Garcinone对鼻咽癌细胞细胞信号通路STAT3表达的影响52-55
• 三 讨论55-57
• 全文小结57-58
• 参考文献58-65
• 中文综述65-83
• 摘要65
• Abstract65
• 0.引言65-66
• 1 α-倒捻子素的结构和来源66-67
• 2 α-倒捻子素抑制肿瘤细胞的增殖67-68
• 3 α-倒捻子素触发肿瘤细胞凋亡机制68-70
• 4 α-倒捻子素对肿瘤细胞侵袭转移的抑制70-72
• 5 α-倒捻子素对肿瘤细胞的其他作用72
• 6 总结与展望72-74
• 参考文献74-83
• 个人简历83-84
• 致谢84-85

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

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本文编号：453011