Smad1在小鼠屈光发育及形觉剥夺性近视形成中的作用

发布时间：2017-06-22 09:03

  本文关键词：Smad1在小鼠屈光发育及形觉剥夺性近视形成中的作用，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:研究C57BL/6小鼠屈光发育及形觉剥夺性近视(form-deprivation myopia,FDM)模型中BMP/TGF-β信号通路下游因子Smad1的表达情况,探究Smad1在屈光发育及形觉剥夺性近视形成过程中的作用及机制。方法:取21日龄实验小鼠96只,分为实验组(n=48只)和正常对照组(n=48只)。实验组右眼采用遮盖法进行形觉剥夺,左眼自然暴露作为自身对照组,正常对照组双眼均不予任何处理。实验组和正常对照组分别以7d、21d、28d建立动物近视模型。在各实验时间点对各组小鼠分别进行以下检测:带状光检影测量屈光度;电子游标卡尺测量眼轴长度;苏木素-伊红(HE)染色联合光镜观察眼球后壁形态学变化;免疫荧光染色法及免疫组织化学法检测眼球后壁Smad1蛋白表达情况;实时荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR)检测眼球后壁中Smad1 m RNA表达情况。结果:(1)形觉剥夺7d时,实验眼屈光度、眼轴长度与自身对照眼、正常对照眼相比无显著性差异(P0.05);形觉剥夺21d、28d后,实验眼分别诱导出(-4.65±0.13)D及(-7.40±0.27)D的相对近视,眼轴分别拉长(16±12)um及(21±13)um,与自身对照组及正常对照组相比,差异均具有统计学意义(P均0.05),且近视漂移程度随着剥夺时间的延长而加深(P0.05);(2)相比自身对照组及正常对照组,眼球后壁形态学观察可见形觉剥夺21d、28d时实验眼视网膜(尤其是内层区)明显变薄、细胞结构排列稀疏,巩膜变薄、胶原纤维排列紊乱;(3)免疫荧光法结果示Smad1表达于巩膜和视网膜(尤其是内层区和外核层);免疫组织化学染色法及QRT-PCR结果显示,在正常对照组中Smad1的表达并没有随着鼠龄的增长而增加,而在形觉剥夺实验眼中Smad1 m RNA及蛋白表达量较自身对照组及正常对照组均明显减少,差异具有统计学意义(P0.05)。自身对照组的上述所有检测指标与正常对照组相比均无明显差异(P0.05)。结论:(1)正常C57BL/6小鼠屈光发育呈远视化进展,Smad1未参与小鼠远视屈光的调节;(2)FDM诱导过程中,Smad1的表达随着剥夺时间的延长而呈下调趋势,提示Smad1在近视形成过程中具有保护性作用,其可能通过影响视网膜-BMP/TGF-β信号通路参与FDM的形成。
【关键词】：Smad1 视网膜 形觉剥夺性近视 C57BL/6小鼠
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R778.11
【目录】：

• 中文摘要2-3
• Abstract3-6
• 引言6-8
• 第一章 材料与方法8-18
• 1.1 实验材料8-11
• 1.1.1 实验主要试剂8-9
• 1.1.2 实验器材9-10
• 1.1.3 动物形觉剥夺性近视模型的建立10-11
• 1.2 实验方法11-17
• 1.2.1 检测指标与组织学标本的制作11-12
• 1.2.2 眼球后壁HE形态学观察12-13
• 1.2.3 免疫荧光法检测Smad1的表达13
• 1.2.4 免疫组织化学染色法检测 Smad1 的表达13-14
• 1.2.5 实时荧光定量PCR检测Smad1mRNA表达14-17
• 1.3 统计学处理17-18
• 第二章 实验结果18-27
• 2.1 屈光度、眼轴长度结果18-20
• 2.2 光镜下眼球后壁的改变20-22
• 2.3 免疫荧光染色结果22-23
• 2.4 免疫组织化学染色结果23-25
• 2.5 QRT-PCR 结果25-27
• 第三章 讨论27-31
• 结论31-32
• 参考文献32-35
• 综述35-51
• 参考文献44-51
• 攻读学位期间的研究成果51-52
• 致谢52-53

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前8条

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本文编号：471282