霍乱毒素B亚单位与荧光金在视网膜神经节细胞逆行示踪中的比较

发布时间：2017-07-04 09:26

  本文关键词：霍乱毒素B亚单位与荧光金在视网膜神经节细胞逆行示踪中的比较

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【摘要】：目的:比较两种常用逆行示踪剂霍乱毒素B亚单位(Cholera toxin subunit B,CTB)与荧光金(Fluoro-Gold,FG)在SD大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)逆行示踪中的异同。方法:选取22只体重210-240g的雌性SD大鼠,分别在每只大鼠的双侧上丘和外侧膝状体内同时注射逆行示踪剂。颅内注射CTB且术后存活1周或2周的大鼠被分别记作CTB-1w组(n=5只,10眼)和CTB-2w组(n=5只,10眼);颅内注射FG且术后存活1周或2周的大鼠被分别记作FG-1w组(n=5只,10眼)和FG-2w组(n=5只,10眼);剩余的2只大鼠颅内注射CTB与FG的等比混合溶液而作为对照组。术后1周或2周后对大鼠处死后取材,将视网膜、视神经和脑组织处理后置于荧光显微镜下观察拍照,用Image-Pro Plus6.0软件对所拍摄的图片进行分析,具体参数包括:RGCs平均密度、RGCs突起平均长度、RGCs突起平均数目、示踪剂的扩散面积。采用IBM SPSS Statistics 22.0软件对所测数据进行统计分析,设定p0.05为差异有统计学意义。结果:在RGCs平均密度和示踪剂扩散面积上,FG-1w组和FG-2w组均明显大于CTB-1w组和CTB-2w组(p均0.001),CTB-2w组明显大于CTB-1w组(p均0.001),但FG-1w组和FG-2w组之间无明显统计学差异(p均0.05)。至于RGCs突起平均长度和RGCs突起平均数目的统计结果,CTB-1w组与CTB-2w组之间以及FG-1w组与FG-2w组之间均无统计学差异(p均0.05),但CTB组的RGCs突起平均长度和RGCs突起平均数目无论是在第1周还是第2周都明显的大于FG组(p均0.001)。同时,研究还发现CTB逆行标记的视神经较FG标记的视神经在形态学上更加清晰。结论:(1)CTB和FG均能够在1周和2周时逆行标记SD大鼠的RGCs;(2)CTB标记的RGCs在形态学上较FG更为清楚,而FG标记的RGCs在数目上较CTB更为全面。
【关键词】：逆行示踪 霍乱毒素B亚单位 荧光金 视网膜神经节细胞 视神经
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R77
【目录】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 缩略语表10-11
• 1 前言11-13
• 2 材料与方法13-20
• 2.1 实验材料13-15
• 2.1.1 实验动物与分组13-14
• 2.1.2 实验仪器与器械14
• 2.1.3 实验试剂与耗材14-15
• 2.2 实验方法15-20
• 2.2.1 示踪剂溶液的配置15
• 2.2.2 上丘及外侧膝状体的逆行标记15-16
• 2.2.3 组织取材及固定16-17
• 2.2.4 视网膜铺片的制备17-18
• 2.2.5 脑片和视神经切片的制备18
• 2.2.6 图像采集与分析18-19
• 2.2.7 数据统计19-20
• 3 结果20-27
• 3.1 RGCS平均密度20-22
• 3.2 RGCS突起平均长度22-23
• 3.3 RGCS突起平均数目23-24
• 3.4 示踪剂的扩散面积24-26
• 3.5 CTB和FG在视神经显影中的比较26-27
• 4 讨论27-31
• 4.1 示踪剂的选择27-28
• 4.2 示踪剂的标记方法28-29
• 4.3 示踪剂标记结果的分析29-31
• 5 结论31-32
• 参考文献32-36
• 综述36-49
• 参考文献42-49
• 主要研究成果49-50
• 致谢50-51
• 导师评阅表51

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本文编号：517269