山柰酚对过敏性鼻炎体内外的影响及相关机制的实验研究

发布时间：2017-08-09 14:13

  本文关键词：山柰酚对过敏性鼻炎体内外的影响及相关机制的实验研究

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【摘要】：背景与目的:过敏性鼻炎是一种常见的难治性的耳鼻咽喉科疾病,它所表现出来的临床症状严重的影响着病人的生活质量。山柰酚是一种从姜科植物山柰以及檀香科植物百蕊草中所提取的天然黄酮类化合物,具有很强的抗炎和抗过敏效应。本次实验旨在研究山柰酚对过敏性鼻炎体内外的影响,并探讨其相关的作用机制。方法:在体内,通过使用卵清蛋白OVA对豚鼠进行腹腔注射和局部滴鼻刺激建立豚鼠过敏性鼻炎模型,不同浓度的山柰酚(5 mg/kg、20 mg/kg)和氯雷他定(2 mg/kg)分别对豚鼠进行灌胃给药。通过记录豚鼠的抓鼻和打喷嚏次数,评价豚鼠过敏性鼻炎的症状;HE染色观察豚鼠鼻黏膜病理形态的改变及鼻黏膜中嗜酸性粒细胞的浸润数量;通过豚鼠脾脏指数来确定豚鼠机体炎症反应的状况;ELISA法检测豚鼠血清中组胺、IgE、IL-4、IL-6、IL-8、IL-1β和TNF-α的水平。在体外,利用MTT法检测山柰酚对肥大细胞的细胞毒性作用,并确定山柰酚的给药浓度。分别用化合物48/80和脂多糖(LPS)刺激肥大细胞使肥大细胞处于致敏状态,不同浓度的山柰酚(10、20、40μmol·L-1)作用于处于致敏状态的肥大细胞,利用甲苯胺蓝染色观察肥大细胞的脱颗粒状态;ELISA法检测细胞上清液中组胺、IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α的水平。Western blot检测经不同浓度的山柰酚作用于LPS活化的肥大细胞后,胞质中p-IKKβ、IκBα、p-IκBα和胞核中NF-κB(p65)蛋白水平。结果:在体内,山柰酚能明显改善豚鼠过敏性鼻炎的症状(P0.05),降低血清中组胺、IgE、IL-4、IL-6、IL-8、IL-1β和TNF-α的水平(P0.05)。然而,豚鼠的脾脏指数基本没有改变(P0.05)。在光镜下观察,山柰酚会明显改善豚鼠鼻黏膜的病理形态和减少嗜酸性粒细胞的浸润。在体外,根据MTT法的实验结果,确定了山柰酚的给药浓度范围为5μmol·L-1到40μmol·L-1。山柰酚能够改善致敏的肥大细胞脱颗粒的状态,并且使处于致敏状态的肥大细胞中组胺、IL-6、IL-8、IL-1β和TNF-α的释放量显著下降(P0.01)。同时,山柰酚作用于LPS诱导的处于致敏状态的肥大细胞后,p-IKKβ、p-IκBα和胞核中NF-κB(p65)蛋白水平会显著下降(P0.05)。结论:山柰酚对肥大细胞所介导的过敏性鼻炎有一定的抑制效应,其作用机制可能是抑制IKKβ蛋白的活化,抑制IκBα蛋白的磷酸化,阻止NF-κB(p65)蛋白的核转运,进而影响相关炎症介质的释放。
【关键词】：山柰酚 过敏性鼻炎 肥大细胞 NF-κB
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R765.21
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照4-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-14
• 第一部分 山柰酚减轻卵清蛋白诱导的豚鼠过敏性鼻炎的实验研究14-24
• 1 材料与方法14-17
• 2 结果17-18
• 3 讨论18-24
• 第二部分 山柰酚抑制脂多糖诱导肥大细胞炎症反应的实验研究24-37
• 1 材料与方法24-29
• 2 结果29-31
• 3 结论31-37
• 全文总结37-38
• 参考文献38-43
• 文献综述43-53
• 参考文献49-53
• 致谢53-54
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文54

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本文编号：645684