长链非编码RNA-AB209630与下咽癌增殖、侵袭转移机制的初步研究

发布时间：2017-09-04 14:33

  本文关键词：长链非编码RNA-AB209630与下咽癌增殖、侵袭转移机制的初步研究

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【摘要】：研究背景及目的下咽癌是头颈部常见的恶性肿瘤,恶性程度高,浸润性生长、易转移,浸润和转移是下咽癌致死的主要原因。下咽癌的发病与吸烟、饮酒等生活习俗有关,随着空气污染的加重,近年来下咽癌的发病率有增高的趋势。由于下咽部解剖特点,腔隙隐蔽,患者早期症状不明显,临床确诊并接受治疗时多为临床Ⅲ、Ⅳ期的晚期肿瘤,常累及喉腔、颈段食管和舌根等部位,并多伴有颈部淋巴结转移。手术后可能导致发音、呼吸及吞咽功能障碍,严重影响患者的生活质量。下咽癌术后的局部复发、颈部淋巴结转移和远处转移仍然是影响患者预后的主要因素。因此,深入研究与下咽癌发生、发展、转移有关的分子机制,有助于下咽癌的早期诊断、早期治疗及提高预后。随着功能基因组学的飞速发展,大家把越来越多的注意力转向了对非编码转录产物功能的研究。非编码RNA是一类不具有编码蛋白质功能的RNA分子,但是它们在生命活动中发挥着重要而又广泛的调控作用,相对于蛋白编码序列以及各种小分子RNA,长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)是目前非编码RNA研究的热点。众多研究表明,lncRNA在肿瘤的发生、发展过程中发挥着多种不同的作用(促癌或抑癌作用),它们参与了肿瘤细胞的凋亡调控、浸润与转移等；它们有希望成为肿瘤新型标志物甚至肿瘤治疗的靶点,在肿瘤诊断、治疗以及患者预后评价方面显示出良好的应用前景。在该研究中,我们旨在发现新的与HSCC有关的lncRNAs,并对显著异常表达的lncRNA与下咽癌增殖、侵袭转移机制进行初步研究,研究其是否会成为下咽癌潜在生物标志物。研究方法我们选取了3对下咽癌标本(包括癌组织和癌旁组织),利用Arraystar lncRNA芯片(长链非编码RNA芯片)对下咽癌及癌旁组织进行系统性筛查,发现了在下咽癌中差异表达的数个lncRNAs及蛋白编码基因,分别为AB019562、 AB209630, SPP1、TJP2。另外,采用实时定量PCR技术在20对下咽癌和癌旁组织标本中分析,发现实时定量PCR结果与芯片结果一致。我们选取了在下咽癌组织中表达最显著降低的lncRNA-AB209630并构建了慢病毒表达载体,以lncRNA-AB209630高表达的下咽癌FaDu细胞系为模型,进行了体外MTT、克隆形成、肿瘤细胞侵袭等功能试验。结果我们在下咽癌组织中发现了异常表达的lncRNAs,其中lncRNA-AB209630在下咽癌组织中表达较癌旁组织明显降低,通过体外功能实验发现lncRNA-AB209630过表达可抑制下咽癌细胞系Fadu的增殖和侵袭、并诱导细胞凋亡。提示lncRNA-AB209630是下咽癌中具有潜在抑癌功能的lncRNA。结论lncRNAs在下咽鳞状细胞癌的临床意义和生物功能仍然不太为人所知,我们在下咽癌组织中发现了异常表达的lncRNAs,研究初步证实了lncRNA-AB209630在下咽癌的增殖、侵袭转移过程中起重要的调控作用,为研究下咽癌的发生机理、发展变化、侵袭转移、预后等提供了一些新的线索和研究思路,将加深对下咽癌的发生发展、侵袭及转移机理的认识,并为下咽癌新型治疗策略提供理论依据。
【关键词】：下咽癌 长链非编码RNA 头颈部肿瘤 增殖 侵袭转移
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R739.63
【目录】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 符号说明11-12
• 前言12-18
• 第一章 材料与设备18-21
• 1 实验材料18-19
• 2 主要实验设备19-21
• 第二章 下咽癌异常表达的lncRNA的筛选21-28
• 1 病人和临床样本21
• 2 实验方法21-23
• 3 结果与计算23-24
• 4 IncRNA基因芯片检测24
• 5 实时定量PCR组织学验证24-28
• 第三章 lncRNA AB209630对下咽癌细胞生物学行为的影响28-32
• 1 FaDu细胞的培养及过表达慢病毒载体构建28-29
• 2 体外功能实验29-32
• 第四章 结果32-41
• 1 下咽癌患者的临床资料32
• 2 下咽癌中异常表达IncRNA的筛选32-34
• 3 qRT-P抓验证AB209630与AB019562二者的差异表达34
• 4 构建lncRNA-AB209630高表达慢病毒载体34-35
• 5 研究AB209630在FaDu细胞系的功能35-40
• 6 统计分祈40-41
• 第五章 讨论41-45
• 参考文献45-53
• 综述 lncRNA在肿瘤领域的研究进展53-59
• 参考文献57-59
• 致谢59-60
• 攻读学位期间发表的学术论文60-61
• 学位论文评阅及答辩情况表61

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1 李茂才;长链非编码RNA-AB209630与下咽癌增殖、侵袭转移机制的初步研究[D];山东大学;2015年

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本文编号：792098