2-甲氧基雌二醇对鼻咽癌CNE-2干细胞体外增殖、迁移及放疗敏感性的影响

发布时间：2017-09-27 13:26

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【摘要】：目的探讨2-甲氧基雌二醇(2-methoxyestradiol,2-Me OE2)对人鼻咽癌CNE-2干细胞(nasopharyngeal cancer stem cells,NPCSCs)增殖、迁移及放疗敏感性的影响及其可能机制。方法收集本课题组前期富集并已鉴定的鼻咽癌CNE-2干细胞,Western blot检测亲本CNE-2细胞及NPCSCs乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)和核转录因子(NF-κB p65)的蛋白表达,克隆形成实验检测两组细胞的放射敏感性。按2-Me OE2浓度分为3组,分别用0、4、8μmol/L 2-Me OE2处理鼻咽癌干细胞,倒置显微镜观察细胞形态变化,CCK-8及Transwell检测细胞增殖及迁移能力,再联合X射线(0、2、4、8 Gy)照射,克隆形成实验检测3组细胞放疗敏感性;同时用4μmol/L 2-Me OE2处理鼻咽癌干细胞后不同时间(0、24、48 h)提取蛋白,Western blot检测不同浓度2-Me OE2处理以及4μmol/L 2-Me OE2处理后0、24、48 h提取的干细胞HIF-1α和NF-κB p65蛋白表达。结果相对于亲本CNE-2细胞,干细胞HIF-1α和NF-κB p65蛋白表达明显增高(P均0.01),X射线辐射后干细胞各放射学参数D0、Dq、N及SF2均高于亲本CNE-2细胞。0、4、8μmol/L 2-Me OE2处理干细胞后,随浓度增加,致密球状生长的干细胞微球体逐渐变得离散,干细胞增殖活力降低(P0.01);迁移能力降低(P0.01);放疗敏感性增高,4μmol/L2-Me OE2组放射增敏比(sensitivity enhancement ratio,SER)为1.19,8μmol/L 2-Me OE2组SER为1.39;HIF-1α、NF-κB p65蛋白表达降低(P0.01),呈浓度依赖性。2-Me OE2(4μmol/L)处理干细胞后随时间延长HIF-1α、NF-κB p65蛋白表达明显降低(P0.01),呈时间依赖性。结论相对于亲本CNE-2细胞,干细胞高表达HIF-1α和NF-κB p65,并且对放疗具有较低的敏感性。2-Me OE2能有效抑制鼻咽癌CNE-2干细胞增殖、迁移并增加其放疗敏感性,其机制可能为2-Me OE2抑制HIF-1α和NF-κB p65蛋白表达。
【作者单位】： 重庆医科大学附属第一医院肿瘤科;重庆医科大学基础医学院放射医学与肿瘤教研室;遵义医学院附属医院肿瘤科;遵义医学院第三附属医院肿瘤科;
【关键词】： 鼻咽癌 癌干细胞 HIF-α -MeOE NF-κB p 放疗敏感性
【基金】：国家自然科学基金(81560444) 贵州省卫计委立项课题(gzwjkj2014-2-167) 贵州省科技厅社会发展攻关课题(黔科合SY字[2015]3046号)——子课题~~
【分类号】：R739.63
【正文快照】： 三附属医院肿瘤科4)and 8 Gy.Total proteins were extracted in 0,24 and 48 h after the cells treated by 2-Me OE2(4μmol/L).Western blotting and colony formation assay were used to detect protein expression of HIF-1αand NF-κB p65and radiosensitivity of CNE

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本文编号：929958