氧化损伤诱导的人晶状体上皮细胞系基因表达谱的差异和表型改变

发布时间：2017-10-05 22:06

  本文关键词：氧化损伤诱导的人晶状体上皮细胞系基因表达谱的差异和表型改变

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【摘要】：目的:探讨人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)氧化刺激后基因表达谱的差异以及相应的表型改变。方法:培养人晶状体上皮细胞系HLE-B3并给予H_2O_2刺激。24h后,提取细胞总RNA进行基因表达谱芯片检测,并采用生物信息学数据库DAVID对氧化刺激组相比对照组显著上调的基因进行Gene Ontology(GO)功能富集分析。RT-q PCR对上调的基因进行验证。通过MTT和流式细胞仪检测细胞凋亡水平。结果:表达谱芯片结果显示,氧化刺激造成HLEC中367个基因上调,GO分析表明这些基因富集于310个功能类别中,主要包括p53信号通路、细胞凋亡通路、细胞程序性死亡通路等。RT-q PCR结果证实,6个主要参与促凋亡或抗凋亡调节的基因,包括BCL2A1、TP53I3、FAS、ZMAT3、DDB2和BCL2L1,在氧化刺激后表达水平明显上升。MTT实验和流式细胞仪检测结果显示,H_2O_2刺激后HLEC凋亡逐渐上升,是细胞氧化损伤的主要表现。结论:氧化刺激可同时诱导HLEC中促凋亡基因和抗凋亡基因表达水平上调,但最终仍然导致了细胞凋亡。
【作者单位】： 第四军医大学唐都医院眼科;第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室;
【关键词】： 人晶状体上皮细胞 氧化损伤 表达谱芯片 细胞凋亡
【基金】：国家自然科学基金(No.81370997)~~
【分类号】：R776.1
【正文快照】： 0引言晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)是晶状体抵抗氧化损伤、维持正常生理功能的重要防线。健康的LEC可合成抗氧化物及抗氧化酶,调节晶状体内环境,修复受损细胞及蛋白质等,LEC的生理状态对于保持晶状体透明性至关重要[1-2]。然而,来自外界环境的刺激如紫外线照射

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2 彭惠,李平华;细胞因子与晶状体上皮细胞[J];眼科新进展;2001年01期

3 王冰,翁景宁;腺病毒载体介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因/丙氧鸟苷体系对晶状体上皮细胞的作用[J];中华眼科杂志;2002年10期

4 孙慧敏,张晓红,袁佳琴,苑晓勇;肿瘤坏死因子-α和转化生长因子-β2对牛晶状体上皮细胞分化的影响[J];中华眼科杂志;2002年11期

5 柳夏林,刘奕志,刘欣华,郑湖玲;老年性白内障的不同类型与晶状体上皮细胞密度的改变[J];中山医科大学学报;2002年01期

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本文编号：979075