盐霉素对鼻咽癌CNE-2干细胞放疗敏感性的影响

发布时间：2017-10-06 02:35

  本文关键词：盐霉素对鼻咽癌CNE-2干细胞放疗敏感性的影响

  更多相关文章： 盐霉素 鼻咽癌 干细胞 放疗敏感性

【摘要】：实验目的：探讨盐霉素对鼻咽癌CNE-2干细胞放疗敏感性的影响。实验方法：第一部分：CNE-2细胞无血清培养培养,并鉴定CNE-2细胞微球干细胞特性鼻咽癌CNE-2细胞无血清培养基培养,镜下观察其细胞形态；加入SSM培养基观察CNE-2-CSC分化能力：采用Transwell小室法、流式细胞术、克隆形成实验分别检测其侵袭能力、CD133表达率、细胞增殖能力。第二部分：盐霉素对鼻咽癌CNE-2干细胞放疗敏感性的影响鼻咽癌干细胞无血清培养,MTT检测盐霉素药物剂量反应及不同放射剂量CNE-2-CSC细胞增殖能力,MTS法检测细胞抑制率；克隆形成实验检测盐霉素对CNE-2-CSC细胞的放射增敏作用；采用RT-PCR、Western blot法检测人鼻咽癌干细胞中Rad51、Ku70、Ku80基因及蛋白表达水平。实验结果：第一部分：无血清培养的CNE-2-CSC细胞镜下呈球状悬浮生长,折光性强；CNE-2-SCS加入SSM培养基,细胞分化出与CNE-2细胞形态相似的细胞；与普通CNE-2细胞相比,CNE-2-CSC具有较强的侵袭能力,(142±7)／视野VS(63±8)／视野,P0.01；高表达CD133,其阳性表达率分别为(98.29±1.28)%和(1.58±0.28)%,P0.01：CNE-2-CSC细胞具有较强的自我增殖能力,克隆形成数明显高于CNE-2细胞。第二部分：MTT法检测出盐霉素IC50=3.026μM, SF2μM=62.4±3.3%,6MV-X射线LD50=8.226Gy, SF6Gy=75.7±1.89%.盐霉素联合射线处理组细胞抑制率比单用盐霉素组、单用X射线照射组明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。克隆形成实验显示盐霉素降低了受照射后CNE-2-CSC细胞的克隆形成率,根据拟合存活曲线计算出放射生物学参数提示盐霉素提高了放射敏感性,单击多靶模型计算反射增敏比为1.345。盐霉素联合射线组鼻咽癌干细胞Rad51、Ku70和Ku80 mRNA表达水平明显低于射线组,差异有统计学意义(P0.05)。盐霉素联合射线组鼻咽癌干细胞Rad51、Ku70口Ku80蛋白表达水平显著低于单独射线组,差异有统计学意义(P0.05)。结论： CNE-2干细胞培养成功,并具有较强的侵袭能力、增殖能力和高表达CD133。盐霉素联合放疗能够明显抑制人鼻咽癌CNE-2干细胞增殖、并抑制细胞中Rad51、Ku70和Ku80的基因及蛋白表达,这表明盐霉素对针对鼻咽癌干细胞放疗具有协同作用,其机制可能是通过阻止DNA修复实现。
【关键词】：盐霉素 鼻咽癌 干细胞 放疗敏感性
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R739.63
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照表5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 前言11-13
• 第一部分 CNE-2细胞无血清培养并鉴定CNE-2细胞微球干细胞特性13-20
• 1 材料和试剂13-14
• 2 实验方法14-16
• 3 实验结果16-19
• 4 讨论19-20
• 第二部分 盐霉素对鼻咽癌干细胞放疗敏感性的影响20-35
• 1 材料和试剂20-21
• 2 实验方法21-28
• 3 实验结果28-33
• 4 讨论33-35
• 参考文献35-38
• 全文总结38-39
• 文献综述 盐霉素抗肿瘤活性研究进展39-52
• 参考文献46-52
• 致谢52-53
• 硕士期间发表的论文53

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 张鹏伟;储消和;郭美锦;储炬;庄英萍;张嗣良;;响应面设计优化盐霉素发酵条件[J];中国抗生素杂志;2010年02期

2 陈代杰,周光悹,许文思;盐霉素生物合成的研究——Ⅰ.浅蓝菌素对盐霉素生物合成的影响[J];抗生素;1988年03期

3 陈代杰,周光悹,许文思;盐霉素生物合成的研究 Ⅱ.短链脂肪酸在盐霉素生物合成中作用机制的初步探讨[J];抗生素;1988年03期

4 蒋顺进;汤晓林;;盐霉素发酵工艺的优化研究[J];今日药学;2010年10期

5 高圣君;杭海峰;陈中兵;郭美锦;储炬;庄英萍;张嗣良;;流加葡萄糖策略对盐霉素生物合成调控影响[J];中国抗生素杂志;2013年08期

6 董秀云;徐文浩;谢志斌;殷娟;何鹏;张静;杨菲;;成功救治急性盐霉素中毒一例[J];临床合理用药杂志;2011年25期

7 刘朋;杭海峰;储消和;郭美锦;储炬;庄英萍;张嗣良;;盐霉素自身抗性高产突变菌株筛选[J];中国抗生素杂志;2012年02期

8 董秀云;徐文浩;谢志斌;殷娟;何鹏;张静;杨菲;;成功救治急性盐霉素中毒一例[J];中国全科医学;2010年32期

9 杨亚勇;蒋顺进;;提高白色链霉菌盐霉素产量的工艺研究[J];中国抗生素杂志;2006年11期

10 邵明举;邢介玲;王兴蕾;邵华;刘红;许荣廷;姜笃银;;误食盐霉素中毒致死亡1例[J];山东大学学报(医学版);2008年03期

中国重要会议论文全文数据库 前3条

1 马立农;陈杖榴;;高效液相色谱柱前衍生化法测定饲料中的盐霉素[A];第四届中国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2001年

2 石永芝;王海;林建强;曲音波;;盐霉素发酵补油工艺研究[A];中国资源生物技术与糖工程学术研讨会论文集[C];2005年

3 陈智慧;;管碟法测定饲料中盐霉素的不确定度评定[A];首届中国兽药大会动物药品学暨中国畜牧兽医学会动物药品学分会2008学术年会论文集[C];2008年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 山东鲁抗动植物生物药品事业部 张正海 孟伟民 朱志强;盐霉素的应用及前景[N];中国畜牧水产报;2000年

2 ;盐霉素的应用及前景[N];中国畜牧水产报;2001年

3 中国农业科学院饲料研究所　武书庚 张海军 李鹏 齐广海 宁夏多维药业有限公司　秦耀明;盐霉素对猪生产性能的影响[N];中国畜牧兽医报;2006年

4 ;盐霉素的应用及前景（未完待续）[N];中国畜牧水产报;2001年

5 $$四川农业大学动物营养研究所 张克英 陈代文 $$山东鲁抗动植物生物药品事业部 张正海 周庆举;盐霉素对生长猪生产性能的影响及适宜添加量的研究[N];中国畜牧水产报;2001年

6 记者 陈青 通讯员 余飞;盐霉素可抑制肝胰腺肿瘤生长[N];文汇报;2013年

7 ;盐霉素的应用及前景（未完待续）[N];中国畜牧水产报;2000年

8 ;盐霉素的应用及前景（未完待续）[N];中国畜牧水产报;2001年

9 莱州市畜牧兽医站 原丽丽;随意加大盐霉素用量不可取[N];山东科技报;2006年

10 ;盐霉素的应用及前景（未完待续）[N];中国畜牧水产报;2000年

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 马驰;联合应用甲萘醌、维生素C和盐霉素治疗胶质瘤的体外研究[D];吉林大学;2014年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 储消和;盐霉素高产菌推理选育及发酵工艺研究[D];浙江工业大学;2008年

2 张劲松;盐霉素颗粒剂工艺的改进研究[D];天津大学;2011年

3 张鹏伟;盐霉素发酵过程优化与放大研究[D];华东理工大学;2010年

4 戚凤娥;盐霉素发酵工艺的调控分析与放大[D];山东大学;2006年

5 赵福琴;盐霉素对家兔急性、亚慢性毒性机理的研究[D];河北农业大学;2005年

6 石永芝;高脂酶活力盐霉素高产菌株选育及发酵工艺优化[D];山东大学;2005年

7 刘朋;盐霉素菌种选育和补油发酵工艺的优化[D];华东理工大学;2011年

8 吴丹心;盐霉素抑制鼻咽癌细胞增殖并诱导凋亡的实验研究[D];南方医科大学;2014年

9 张郭娟;盐霉素通过调节β-catenin和mTOR信号通路抗前列腺癌干细胞的机理[D];南华大学;2014年

10 苏小康;盐霉素对肝癌细胞HepG2体外抑制作用的研究[D];南华大学;2014年

，

本文编号：980233