趋化因子CCL20在干眼小鼠眼表细胞表达研究

发布时间：2017-10-07 01:22

  本文关键词：趋化因子CCL20在干眼小鼠眼表细胞表达研究

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【摘要】：目的:检测趋化生长因子20(CCL20)在干眼小鼠眼表的表达及抗CCL20抗体对小鼠干眼的抑制作用,探索CCL20在干眼发病中的作用。方法:6周龄C57BL/6小鼠18只,随机分为对照组、干眼PBS注射组、干眼抗CCL20抗体注射组,每组6只。对照组不做任何处理,PBS注射组及CCL20抗体注射组置恒温恒湿造模室内,给予双下肢交替注射氢溴酸东莨菪碱及不间断吹风建立干眼模型,两组分别隔日结膜下注射25μlPBS及抗CCL20抗体,第11日收集各组小鼠泪液后处死小鼠并分别采集各组小鼠的角膜和结膜,通过Real-Time PCR、免疫组化染色、泪液luminex检测各组小鼠角膜结膜组织中CCL20和IL-17的表达。结果:1.Real-Time PCR检测对照组、干眼PBS注射组、干眼抗CCL20抗体注射组小鼠角膜CCL20 mRNA分别为:1.00±0.00、1.45±0.11、0.23±0.04。对照组、干眼PBS注射组、干眼抗CCL20抗体注射组小鼠结膜CCL20 mRNA表达分别为:1.00±0.00、6.38±1.86、0.32±0.14。对照组、干眼PBS注射组、干眼抗CCL20抗体注射组小鼠角膜IL-17mRNA表达分别为:1.00±0.00、4.05±0.19、1.67±0.34。对照组、干眼PBS注射组、干眼抗CCL20抗体注射组小鼠结膜IL-17 mRNA表达分别为:1.00±0.00、4.08±1.38、0.74±0.29。干眼PBS注射组小鼠角膜和结膜的CCL20mRNA、IL-17 mRNA的表达明显高于对照组和干眼抗CCL20抗体注射组,差异均有统计学意义(P0.05)。干眼抗CCL20抗体注射组小鼠的角膜的CCL20 mRNA、IL-17 mRNA的表达低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。2.CCL20浓度,对照组(50.39±7.65)pg/ml,PBS组(134.45±7.0)pg/ml,抗体组(17.52±5.83)pg/ml,组间差异均有统计学意义(P0.05)。泪液IL-17,正常组(100.9±10.12)pg/ml,PBS组(220.88±19.15)pg/ml,抗体组(64.11±5.56)pg/ml,组间差异均有统计学意义(P0.05)。3.免疫组化染色(抗CCL20):干眼PBS注射组眼表细胞中可见棕褐色颗粒,对照组及抗CCL20抗体注射组未见。结论:CCL20参与了小鼠干眼发病,给予干眼小鼠结膜下注射抗CCL20抗体,不仅可以抑制干眼小鼠眼表CCL20的表达,还能抑制干眼炎症相关因子IL-17在眼表的表达,甚至可以将干眼小鼠的眼表的CCL20、IL-17表达降至低于对照组表达水平。抗CCL20抗体对干眼小鼠眼表CCL20表达的抑制效应可能强于对IL-17的表达抑制。
【关键词】：干眼 趋化因子 CCL20 IL-17
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R777.34
【目录】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 前言10-12
• 材料与方法12-20
• 1. 实验材料12-14
• 2. 实验方法14-19
• 3. 统计学方法19-20
• 结果20-24
• 1.Real-Time PCR检测眼表CCL20、IL-17 mRNA的表达情况20-21
• 2.泪液中CCL20、IL-17细胞因子结果21-22
• 3.角膜荧光素钠染色结果22-23
• 4.眼表免疫组化染色23-24
• 分析与讨论24-27
• 结论27-28
• 参考文献28-32
• 综述 Th 细胞及其相关因子参与干眼发病机制的研究进展32-41
• 参考文献38-41
• 在学期间承担的科研课题与研究成果41-42
• 致谢42-43
• 个人简历43

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本文编号：986130