吗替麦考酚酯在炎症性肠病中的作用及对相关细胞因子的影响

发布时间：2017-10-19 13:37

  本文关键词：吗替麦考酚酯在炎症性肠病中的作用及对相关细胞因子的影响

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【摘要】：炎症性肠病(IBD)是一种慢性复发性消化道紊乱性炎症,它可分为克罗恩病(Crohn’s,CD)和溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)两种类型。IBD以免疫反应失调,细胞因子的产生发生改变和细胞炎症为特征,最终导致小肠末端和结肠粘膜的损伤。当前,IBD的发病机理非常复杂且仍然未知,但是它与许多因素有关,例如免疫、遗传、肠道环境和细菌感染等。尤其是免疫学因素已经被发现在炎症性肠病的持续发展和发病机理中起着相当重要的作用。近年来,CD4+T细胞亚群(Th1/Th2)失衡导致促炎和抗炎细胞因子比例失调和免疫反应异常的假说被广泛接受并在IBD的发病机理中具有重要的作用。吗替麦考酚酯(Mycophenolate mofetil,MMF),麦考酚酸的2,4-吗啉代乙酯,是一种新型的免疫抑制药物,并且已经证明在治疗同种异体移植接受者和多种自身免疫紊乱的病人时相当有效。在肝脏中,吗替麦考酚酯(MMF)被转化成MMF的活性形式吗替麦考酚酸(MPA)。吗替麦考酚酸是嘌呤从头合成途径关键限速酶——2型次黄苷酸脱氢酶的非竞争性可逆性抑制剂。MMF能选择性抑制T、B淋巴细胞的增殖,因为它们不像其他类型的细胞能够通过补救途径再循环利用核苷酸,T、B淋巴细胞仅仅能依靠核苷酸的从头合成途径合成嘌呤。因此,MMF的作用可以认为是抑制这类特定的细胞群的增殖。MMF能减少淋巴细胞和单核细胞的募集,从而减少体内炎症部位TNF-α和IL-1β的产生。MMF仅有很低的毒性,其在IBD病人上的使用,特别是在对类固醇依赖,难治或对常规治疗不耐受的病人上使用已经有记录。然而MMF在IBD发生发展中的作用及其免疫抑制的机制尚不明确。本研究将BALB/c小鼠随机分为正常组、对照组、TNBS组、灌胃组和腹腔注射组5个组,使用三硝基苯磺酸(TNBS)诱导小鼠的IBD模型,然后分别在第-1、0、1、2和7天的时候通过灌胃和腹腔注射的方式给予不同剂量的MMF(1mg或2mg/只)。记录小鼠10天的体重和死亡率的变化。分别在第3天和第10天的时候杀死小鼠,采集小鼠的血液和结肠组织,使用q PCR和ELISA方法检测血清和结肠组织中相关细胞因子(IFN-γ、TNF-α、IL-12、IL-6、IL-1β和IL-10)表达的变化及观察结肠组织评分、MPO活性和病理组织切片的变化。收集实验组小鼠的脾淋巴细胞和体外MPA刺激后的正常小鼠脾淋巴细胞,通过流式细胞术分别检测在体和离体情况下,MMF对小鼠脾淋巴细胞特别是CD4+T细胞分化的影响。通过以上试验以期明确MMF在IBD中的免疫抑制机制。结果表明,MMF的治疗不仅能明显改善小鼠腹泻和体重减少等症状,而且缓解了病理组织学的严重性并减轻了结肠的炎症反应,增加了TNBS诱导的结肠炎小鼠的存活率。此外,MMF可明显抑制TNBS诱导的结肠炎小鼠的促炎细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-12、IL-6和IL-1βm RNA的表达,但是MMF没有抑制IL-10 m RNA的表达。ELISA结果表明MMF处理后的TNBS模型组小鼠血清IFN-γ、TNF-α、IL-12、IL-6和IL-1β的水平被显著下调。流式细胞术分析表明MMF可明显减少IBD模型小鼠的Th1/Th2淋巴细胞的比例,在体外试验中,MPA也可明显减少脾淋巴Th1/Th2细胞的比例。这些结果表明MMF的治疗可改善实验性结肠炎,并可通过调节Th1/Th2细胞的分化,下调促炎细胞因子的表达从而诱导IBD炎症反应的缓解。
【关键词】：炎症性肠病 吗替麦考酚酯 Th1/Th2细胞 细胞因子
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R574
【目录】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-13
• 前言13-15
• 第一篇 文献综述15-28
• 第一章 炎症性肠病的流行病学及发病机制的研究进展15-23
• 1.1 IBD的流行病学15-18
• 1.2 IBD的发病机制18-22
• 1.3 总结22-23
• 第二章 MMF的作用机制23-28
• 2.1 MMF的药物代谢动力学23-24
• 2.2 MMF影响T淋巴细胞的增殖和凋亡24
• 2.3 MMF影响细胞因子的产生24-25
• 2.4 MMF对粘附分子和T淋巴细胞募集的影响25-26
• 2.5 单核细胞和巨噬细胞26
• 2.6 树突细胞26-27
• 2.7 小结27-28
• 第二篇 研究内容28-69
• 第一章 小鼠IBD模型的建立、鉴定28-35
• 1.1 材料与方法28-31
• 1.2 实验结果31-33
• 1.3 讨论33-34
• 1.4 小结34-35
• 第二章 MMF对TNBS诱导的结肠炎小鼠的体重、存活率、临床表现及病理组织学特征的影响35-44
• 2.1 材料与方法35-39
• 2.2 结果39-42
• 2.3 讨论42-43
• 2.4 小结43-44
• 第三章 MMF对IBD模型小鼠结肠和血清中相关细胞因子表达的影响44-57
• 3.1 材料与方法44-50
• 3.2 实验结果50-54
• 3.3 讨论54-56
• 3.4 小结56-57
• 第四章 MMF对IBD模型小鼠Th1/Th2细胞分化的影响57-69
• 4.1 材料与方法57-62
• 4.2 实验结果62-66
• 4.3 讨论66-68
• 4.4 小结68-69
• 结论69-70
• 参考文献70-82
• 导师简介82-83
• 作者简介83-84
• 硕士期间发表的学术论文84-85
• 致谢85

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

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本文编号：1061404