威灵仙总皂苷干预实验性NASH大鼠氧化应激的疗效和机制研究

发布时间：2017-11-13 08:31

  本文关键词：威灵仙总皂苷干预实验性NASH大鼠氧化应激的疗效和机制研究

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【摘要】：[目的]本实验采用高脂饲料饲养SD大鼠建立实验性NASH大鼠模型,并给予威灵仙总皂苷灌胃干预,通过检测实验性NASH大鼠模型组、威灵仙总皂苷组、易善复组、空白组下腔静脉血清中丙二醛含量、总抗氧化能力以及肝组织上清液中丙二醛含量、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶的活力,并分别统计分析各组间氧化能力的差异和抗氧化能力的差异,以观察和探讨威灵仙总皂苷干预实验性NASH大鼠氧化应激的疗效和作用机制。[方法]建模方法：从50只清洁级健康雄性SD大鼠中随机抽取14只组成空白组,剩余的36只作为造模组。空白组用普通饲料喂养16周；造模组用高脂饲料(饲料配比：82.5%普通饲料+10%猪油+5%蛋黄粉+2%胆固醇+0.5%胆酸钠)喂养16周。然后在造模期间的第4周末随机选择空白组和造模组各1只、第8周末各1只、第12周末各2只、第16周末各2只,分别称量体重、肝湿重；计算肝指数；下腔静脉采血测定AST、ALT、TC、TG水平；于肝右叶中央部位取适量肝组织,行HE染色后在光镜下观察肝脏脂肪变、炎症和纤维化的情况,最后根据检测及观察的结果来评估实验性NASH大鼠模型是否成功建立。干预方法：实验性NASH大鼠模型成功建立后,将剩余的30只造模组大鼠随机分为模型组、易善复组和威灵仙总皂苷组,每组10只,继续饲以高脂饮食；剩余的8只原空白组大鼠作为空白组,继续饲以普通饮食。依次分别给予0.9%NS、易善复[195.4 mg/(kg.d)]、威灵仙总皂苷[50mg/(kg.d)]、0.9%NS配成3m1溶液,灌胃干预8周,密切观察各组大鼠的一般情况。8周后,4组大鼠下腔静脉采血测定丙二醛含量和总抗氧化能力,取肝组织上清液测定丙二醛含量和谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶和超氧化物歧化酶的活力,并分别统计分析各组间氧化能力的差异和抗氧化能力的差异。[结果]1造模结果：1.1大鼠一般状况：造模组大鼠逐渐出现皮毛光泽度变差,活动量减少,食欲降低,饮水量增加,大便变软、变稀等情况,而空白组大鼠毛发整齐有光泽,活动力强,进食饮水量正常,大便性状正常等。1.2大鼠的体重、肝湿重和肝指数：造模组和空白组体重均逐渐增加,但差异无统计学意义(P=0.351)；造模组和空白组肝湿重均逐渐增加,两组间差异有统计学意义(P=0.011)；造模组肝指数呈逐渐上升趋势,空白组肝指数未见明显上升趋势,两组间差异有显著统计学意义(P=0.000)。1.3大鼠转氨酶和血脂指标：造模组的AST、ALT、TG呈逐渐升高趋势,而TC在第4周末起基本维持稳定,空白组的AST、ALT、TC、TG未见明显升高；造模组的AST、ALT、TC和TG都明显高于空白组,两组间差异均有统计学意义(分别为P=0.000,P=0.002, P=0.0000, P=0.023)。1.4大鼠肝脏观察：肉眼观察：造模组肝脏表面光泽度差,色淡黄,体积增大,肝脏边缘稍钝,切面有油腻感；空白组肝脏表面光滑、质软,色粉红,体积适中,肝脏边缘锐。镜下观察：造模组肝脏组织学表现呈现典型“正常—非酒精性脂肪肝—非酒精性脂肪性肝炎”的病变规律,未见肝纤维化。第16周末时,造模组肝脏脂肪变分度为Ⅳ度(F4),肝脏炎症分级为2级(G2),肝纤维化程度分期为0期(S0),NAS积分为8分,空白组为FOGOSO, NASO分,造模组和空白组间肝脏脂肪变分度、肝脏炎症分级、NAS积分的差异均有统计学意义(分别为P=0.005, P=0.021, P=0.000)。1.5综合评估：高脂饲料(配方：82.5%普通饲料+10%猪油+2%胆固醇+5%蛋黄粉+0.5%胆酸钠)饲养SD大鼠16周,实验性NASH大鼠模型(F4G2SO, NAS8分)建立成功,伴有体重超重、肝指数升高、高脂血症、转氨酶异常。2干预结果：2.1大鼠一般情况：经灌胃干预后,易善复组、威灵仙总皂苷组大鼠皮毛不光整,活动量减少,食欲降低的情况较模型组有所改善；模型组、易善复组、威灵仙总皂苷组饮水仍较多,大便性状仍旧软、稀,其中威灵仙总皂苷组大鼠大便变软和变稀情况较为明显；空白组大鼠皮毛较为光整,活动力正常,进食饮水量无异常,大便性状正常。各组大鼠体重增加都相对放缓。2.2大鼠血清丙二醛(Malondialdehyde, MDA)与肝组织MDA含量：空白组与模型组相比,模型组血清及肝组织MDA含量高于空白组,差异均具有显著统计学意义(P0.01)；威灵仙总皂苷组与模型组相比,威灵仙总皂苷组血清及肝组织MDA含量低于模型组,差异均有统计学意义(P0.05)；易善复组与模型组相比,易善复组血清及肝组织MDA含量低于模型组,差异均有统计学意义(P0.05)；空白组、威灵仙总皂苷组和易善复组两两间相比,血清及肝组织MDA含量相当,差异均无统计学意义(P0.05)。2.3大鼠血清总抗氧化能力(Total antioxidant capacity, T-AOC)与肝组织谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase, GSH-Px)、过氧化氢酶(Catalase, CAT)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)活力：空白组与模型组相比,模型组血清T-AOC、肝组织GSH-Px、CAT、SOD活力低于空白组,差异均具有显著统计学意义(P0.01)；威灵仙总皂苷组与模型组相比,威灵仙总皂苷组血清T-AOC、肝组织GSH-Px、CAT、SOD活力高于模型组,差异均有统计学意义(P0.05)；易善复组与模型组相比,易善复组血清T-AOC.肝组织GSH-Px、CAT、SOD活力高于模型组,差异均有统计学意义(P0.05)；空白组、威灵仙总皂苷组和易善复组两两间相比,血清T-AOC、肝组织GSH-Px、CAT、SOD活力相当,差异均无统计学意义(P0.05)。[结论]1.采用高脂饲料(82.5%普通饲料+10%猪油+2%胆固醇+5%蛋黄粉+0.5%胆酸钠)饲养SD大鼠16周,可以成功建立实验性NASH大鼠模型,但不伴肝纤维化。2.实验性NASH大鼠模型存在氧化应激。3.威灵仙总皂苷和易善复均可以有效提高实验性NASH大鼠血清T-AOC、肝组织GSH-Px、CAT、SOD活力,减少脂质过氧化产物MDA含量,从而改善氧化应激,且二者疗效相当。4.威灵仙总皂苷灌胃可能有腹泻的不良反应。
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R575.5

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1 金政和之;林紫雯;;NASH的肝穿刺活组织检查[J];日本医学介绍;2007年04期

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本文编号：1179928