蓝莓对非酒精性脂肪性肝病大鼠Nqo1、GCLC、UCP2表达的影响

发布时间：2017-11-27 17:20

  本文关键词：蓝莓对非酒精性脂肪性肝病大鼠Nqo1、GCLC、UCP2表达的影响

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【摘要】：目的：通过探究蓝莓对非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)大鼠NADPH醌氧化还原酶(NAD(P)H:quinine oxidoreductase 1,Nqo1)、γ-谷氨酸半胱氨酸转移酶催化亚基(Gamma glutamylcysteine synthetase catalytic subunit, GCLC)及解偶联蛋白2(Uncoupling Protein 2, UCP2)表达的影响,进而探讨蓝莓对NAFLD氧化应激损伤和能量合成的作用,并研究其可能的作用机制。方法：以SD大鼠建立非酒精性脂肪性肝病模型,50只大鼠随机分配为①正常组(A组,10只)作为对照；②蓝莓组(B组,10只),以蓝莓原浆(15ml/kg)干预；③异甘草酸镁组(C组,10只),以异甘草酸镁溶液(15mg/kg)干预；④模型组(D组,10只),按造模方案喂饲；⑤京尼平苷组(E组,10只),以京尼平苷溶液(100mg/kg)干预。病理学方法明确造模情况及各干预组肝脏病理学改变,血生化方法检测肝功能丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(Aspartate amino transferse,AST)及脂代谢指标甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol, TC); ELISA法检测肝组织丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、还原型谷胱甘肽(Glutathione Tablets, GSH)含量及超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活性。采用Western Blot技术检测Nqo1、GCLC蛋白表达情况；采用荧光素酶发光法检测肝细胞内ATP的含量,实时荧光定量PCR技术、Western-blot技术检测UCP2的表达。结果：①病理检测结果：正常组HE染色肝小叶结构完整,条索清晰,油红O染色未见红色脂质沉积；模型组HE染色切片可见肝细胞弥漫性空泡变性及肝小叶结构紊乱,部分区域出现炎症细胞浸润,油红O染色见明显脂质沉积；蓝莓组与异甘草酸镁组HE染色肝细胞空泡变性及炎性细胞浸润明显较少,蓝莓组与京尼平苷组油红O染色提示脂质沉积较模型组少。②血生化检测肝功能与脂代谢指标：正常组ALT、AST和TG、TC、FFA含量明显低于模型组(P0.05),蓝莓组ALT、AST和TG、TC、FFA含量明显低于模型组(P0.05),但高于正常组(P0.05),异甘草酸镁组ALT、AST和TG、TC含量低于蓝莓组(P0.05),京尼平苷组ALT、AST和TG、FFA含量与蓝莓组无显著差异。③氧化产物和氧化酶含量检测：正常组与模型组相比MDA含量明显较低(P0.05), SOD活性和GSH含量明显较高(P0.05)；蓝莓组和异甘草酸镁组MDA含量明显低于模型组(P0.05), GSH含量、SOD活性明显高于模型组(P0.05)；异甘草酸镁组各指标与蓝莓组无显著差异。④Nqo1和GCLC蛋白表达：正常组Nqo1及GCLC蛋白表达低于模型组,蓝莓组和异甘草酸镁组Nqo1及GCLC蛋白表达明显高于正常组(P0.05),低于模型组(P0.05)。⑤ATP含量：模型组显著低于正常组(P0.05),蓝莓组显著高于模型组(P0.05),低于京尼平苷组。⑥ UCP2 mRNA和蛋白表达：正常组表达均明显低于模型组(P0.05),蓝莓组表达高于正常组(P0.05),京尼平苷组表达低于蓝莓组(P0.05).结论：蓝莓具有一定抗氧化活性,蓝莓干预可减轻NAFLD大鼠病理损伤和脂质沉积,减少脂质过氧化产物的产生和增加抗氧化酶活性。其机制可能是蓝莓自身具有的抗氧化活性物质通过上调Nqo1、GCLC蛋白表达和下调UCP2蛋白及mRNA表达,进而减少氧化应激产物的产生和调节肝细胞线粒体能量代谢,维持细胞氧化和抗氧化平衡,减轻肝脏氧化应激反应,从而延缓NAFLD的发展。
【学位授予单位】：贵州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R575.5

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本文编号：1232613