溃疡性结肠炎中MMP-2，-9水平与肠黏膜通透性的研究

发布时间：2018-02-17 01:54

  本文关键词： 溃疡性结肠炎 MMP-2 MMP-9 高效液相色谱法 肠黏膜通透性 实验性结肠炎 MMP-2 MMP-9 肠黏膜通透性　出处：《安徽医科大学》2014年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的：研究表明，溃疡性结肠炎(UC)患者存在肠黏膜通透性升高的现象，同时有基质金属蛋白酶(MMPs)表达的改变，MMPs在一定程度上参与肠道炎症和肠黏膜屏障功能损伤的过程，但在UC患者中是否存在一定的关联尚不清楚。本实验通过观察活动期UC患者中MMP-2，9的水平及肠黏膜通透性的改变，探讨UC患者中MMP-2，-9与肠黏膜通透性的临床关联。 方法：收集临床确诊的38例活动性UC患者和30例健康志愿者（正常对照组）的外周血，采用ELISA法检测MMP-2、MMP-9水平，同时收集UC患者的临床资料。采用高效液相色谱(HPLC)方法检测UC组和正常对照组口服乳果糖(L)和甘露醇(M)测试液后尿液中L/M比值作为肠黏膜通透性检测指标。 结果：(1)溃疡性结肠炎患者临床资料分析：UC患者中，按严重程度分类：轻度12例（32%），中度14例（36%），重度12例（32%）；按病变范围分类：全结肠炎12例（32%），左半结肠炎8例（21%），直乙状结肠炎9例（23%），直肠炎9例（24%）。(2)UC组中MMP-2，-9的表达：UC组外周血中MMP-2为（8.34±2.54）ng/ml，MMP-9为（8.56±2.45）ng/ml；正常对照组MMP-2为（1.91±0.30） ng/ml，MMP-9为（2.14±0.31）ng/ml，UC组MMP-2水平和MMP-9水平高于正常对照组（t=2.414，，P0.05；t=2.576，P0.05）。其中，重度组表达水平高于中度组MMP-2：（10.66±1.5VS6.12±0.43，P0.01）;MMP-9：（11.47±1.08VS5.39±0.51，P0.01）；全结肠炎组表达水平高于左半结肠炎组MMP-2：（12.37±1.12VS9.56±0.54，P0.01）、MMP-9：（13.11±1.07VS9.41±0.53，P0.01）。(3) UC患者和健康对照者尿中L/M测定结果:UC组L/M为(0.057±0.020)，正常对照组L/M为(0.030±0.005)，二者相比差异有显著性（P0.05）。重度组患者L/M比值高于中度组，（0.067±0.014VS0.049±0.011，P0.05）；全结肠炎组患者L/M比值高于左半结肠炎组（0.070±0.009VS0.062±0.006，P0.05）。(4) UC组患者外周血中MMP-2、MMP-9水平与其L/M比值呈一定程度相关，（r=0.844，P0.05；r=0.861，P0.05）。 结论：活动期UC患者中MMP-2，MMP-9水平高于健康对照组，同时存在肠黏膜通透性增高。MMP-2，MMP-9水平与肠黏膜通透性升高可能存在临床关联。 目的临床研究发现UC患者存在肠黏膜通透性增高和MMP-2，-9水平改变现象，推测MMP-2，-9可能参与肠黏膜通透性改变的病理生理过程，参与UC肠黏膜损害的发病过程。因此，通过制备实验性结肠炎动物模型，进一步探讨MMP-2、MMP-9水平与肠黏膜通透性改变的关系。 方法采用复合法（三硝基苯磺酸+乙醇）制备结肠炎实验动物模型。实验分为正常对照组和模型组（TNBS+乙醇灌肠）。造模成功后，进行结肠黏膜大体形态损伤评分(CMDI)；HE染色观察大鼠结肠黏膜组织学改变，行结肠组织学损伤评分（HI）；酶联免疫法（ELISA）检测结肠匀浆MMP-2、MMP-9及TNF-α含量；制备小肠肠囊，采用Evans蓝方法检测小肠黏膜通透性。 结果与正常对照组比较，模型组大鼠结肠大体形态学评分（CMDI）及组织损伤学评分（HI）明显增高（P0.05）。模型组大鼠肠黏膜匀浆中MMP-2、MMP-9、TNF-α表达水平显著高于正常对照组MMP-2：(9.41±0.947vs1.17±0.893，P0.05)ng/ml；MMP-9：(13.79±1.357vs2.04±0.719，P0.05) ng/ml；TNF-α：（59.229±5.756vs15.363±2.851, P0.01）ng/L。TNBS模型组大鼠回肠组织中Evans蓝较正常对照组含量明显增高（607±10.387vs108.06±7.49，P0.05）。 结论实验性结肠炎大鼠肠黏膜通透性增高，可能与MMP-2、MMP-9表达增高有关。
[Abstract]:Objective: the study shows that ulcerative colitis (UC) patients with intestinal permeability increased. At the same time, matrix metalloproteinase (MMPs) expression, MMPs participate in the process of inflammation and intestinal mucosal barrier function of intestinal injury in a certain extent, but not in UC patients correlated this is unclear. The experimental observation of MMP-2,9 in patients with UC levels and intestinal permeability of active phase change, MMP-2 of UC patients, the clinical relevance of -9 and intestinal mucosal permeability.
Methods: 38 patients with UC were collected from clinically diagnosed and 30 healthy volunteers (normal control group) in peripheral blood was detected by ELISA MMP-2, MMP-9 level, the clinical data of UC patients were also collected. By using high performance liquid chromatography (HPLC) method for detection of UC group and normal control group (oral administration of lactulose L) and mannitol (M) test solution in urine L/M ratio as intestinal permeability index.
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本文编号：1516946