mTOR信号通路在克罗恩病肠壁纤维化中的作用

发布时间：2018-02-27 04:04

本文关键词： 克罗恩病肠道纤维化 m-TOR p-S6　出处：《皖南医学院》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：背景:克罗恩病(Crohn’s disease,CD)是累及胃肠道的免疫异常的慢性炎症性疾病。炎症的慢性刺激可以引起肠壁组织细胞外基质(Extracellular matrix,ECM)的沉积从而导致肠壁的狭窄,由于目前对该病的发病病因和作用机制尚不明确,尚无疗效确切药物治疗方法,手术治疗易反复发作,因此狭窄型CD的治疗成为治疗难点。目前转化因子-β1(TGF-β1)被认为是纤维化过程中的核心因子,而PI3K/AKT/mTOR信号通路是常见细胞信号传导通路之一,也可参与多种器官的纤维化过程,其在CD肠壁纤维化中是否发挥作用尚不清楚。目的:探讨mTOR信号通路和克罗恩病(CD)肠壁纤维化之间的关系,对实验小鼠CD肠壁纤维化形成过程中的组织内mTOR信号通路可能所引起的作用进行了评估和分析。方法:将30只BALB/c小鼠随机分成对照组(A组)和模型组(B组),每组各15只,分别为A组予生理盐水0.1ml灌肠,B组予TNBS/50%酒精0.1ml灌肠6周,每周1次,灌肠剂中TNBS的浓度呈逐渐递增趋势,分别为0.4mg、0.4mg、0.8mg、0.8mg、1.2mg、1.2mg.于灌肠6周结束后第3天处死小鼠,小鼠处死后收取全部结肠组织进行肉眼和病理观察,在距肛门口4-5cm处收集肠道组织,并进行HE染色,观察结肠组织的炎症程度并进行炎症评分,通过Masson染色评估胶原蛋白增生情况,Western Blot法检测mTOR蛋白及p-S6蛋白的表达情况。结果:1、和对照组比较,模型组中小鼠在造模过程中出现反应迟钝、活动少、精神萎靡不振、皮毛松散、进食量减少、体重减轻等症状,大便可出现半稀便和稀便,潜血实验+-+++不等,但无明显肉眼血便。2、对照组小鼠肉眼可观察到结肠粘膜粉红色,模型组肉眼观察病变结肠僵硬、扭曲、变形、部分肠腔狭窄,长度变短;对照组显微镜下病理观察结肠粘膜和粘膜上皮结构是完整的,未形成溃疡,杯状细胞规则整齐的排列着,结构清晰可见,肠壁各层结构、厚度正常,而模型组显微镜下病理观察到结肠的固有层有炎细胞浸润、上皮细胞破碎、杯状细胞和隐窝减少甚至消失,胶原蛋白增加,炎症评分与组织评分也较对照组明显增高(P0.05)。3、与对照组相比,模型组小鼠结肠组织中的mTOR蛋白以及p-S6蛋白含量表达也明显增加(P0.05)。结论:1、采用TNBS/50%酒精灌肠法能够诱导慢性结肠炎的肠壁纤维化动物模型。该法诱导的动物模型的肠壁慢性炎症和纤维化特征在一定程度上与人类CD相一致。2、在TNBS诱导慢性结肠炎的动物模型中,肠道纤维化是机体免疫系统对慢性炎症反应过度所引起的,其中m-TOR信号中核心蛋白m-TOR及下游蛋白S6蛋白的磷酸化水平的明显增高表明m-TOR信号通路可能参与肠壁纤维化的过程。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：皖南医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R574.62

【参考文献】