人DcR3表达载体的构建及验证
本文选题:诱骗受体 切入点:肝星状细胞 出处:《中国免疫学杂志》2016年10期 论文类型:期刊论文
【摘要】:目的:构建人DcR3表达载体并验证其在体外细胞表达情况。方法:从人血液组织中扩增出DcR3中长度915 bp的CDS区,将其克隆到带有红色荧光的真核表达载体p EF1a-IRES-DsRed-Express2上,用Fu Gene HD转染法转染到肝星状细胞(LX-2)中,用RT-PCR以及Western blot检测其mRNA表达量和蛋白表达量。结果:通过RT-PCR和Western blot检测显示转染DcR3表达载体质粒的肝星状细胞中DcR3的转录和翻译水平均显著性提高。结论:成功构建出人DcR3表达载体并在LX-2细胞中高效表达。
[Abstract]:Aim: to construct a human DcR3 expression vector and verify its expression in vitro. Methods: the 915bp CDS region of DcR3 was amplified from human blood tissue and cloned into eukaryotic expression vector p EF1a-IRES-DsRed-Express2 with red fluorescence. FU Gene HD transfection was used to transfect into hepatic stellate cells (LX-2). RT-PCR and Western blot were used to detect the expression of mRNA and protein. Results: the levels of DcR3 transcription and translation in hepatic stellate cells transfected with DcR3 expression vector plasmid were significantly increased by RT-PCR and Western blot detection. Human DcR3 expression vector was constructed and highly expressed in LX-2 cells.
【作者单位】: 吉林大学第二医院肝胆胰内科;
【基金】:吉林省科学技术委员会面上基金课题(201115083)
【分类号】:R575.2
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