siRNA干预树突状细胞CD40表达对大鼠炎症性肠病的治疗作用

发布时间：2018-03-18 06:23

  本文选题：炎症性肠病　切入点：树突状细胞　出处：《吉林大学学报(医学版)》2015年01期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的:应用小干扰RNA(siRNA)沉默树突状细胞(DCs)CD40分子的表达,观察其对大鼠炎症性肠病(IBD)的影响。方法:设计并合成高效的siRNA载体及真核表达载体pcDNA3-CD40,分别转染入大鼠DCs细胞。采用PCR和Western blotting法检测DCs中CD40mRNA及蛋白表达水平。18只Wistar大鼠采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)建立IBD大鼠模型,分为对照组、干预组及过表达组。对照组大鼠给予生理盐水腹腔注射;干预组大鼠给予含有干涉表达载体pSilencer 4.1-CMV neo-CD40的DCs腹腔注射;过表达组大鼠给予含有pcDNA3-CD40的DCs腹腔注射。15d后观察各组大鼠的腹泻、黏液脓血便等临床症状。结果:成功构建RNA干涉载体并转染DCs,PCR及Western blotting法检测DCs中CD40mRNA及蛋白表达水平均下调。转染后的DCs作用于各组大鼠,与对照组比较,干预组大鼠的腹泻、黏液脓血便症状得到明显改善;过表达组大鼠腹泻、黏液脓血便情况加重,并有2只大鼠死亡。结论:siRNA干预DCs中CD40分子的表达对大鼠IBD具有治疗作用。
[Abstract]:Objective: to silence the expression of CD40 in dendritic cells by small interference RNA-siRNAs. Methods: high efficient siRNA vector and eukaryotic expression vector pcDNA3-CD40 were designed and synthesized and transfected into rat DCs cells respectively. The expression levels of CD40mRNA and protein in DCs were detected by PCR and Western blotting. Wistar rats were used to establish IBD rat model. Rats in the control group were given intraperitoneal injection of normal saline, and rats in the intervention group were given intraperitoneal injection of DCs containing interference expression vector pSilencer 4.1-CMV neo-CD40. Rats in overexpression group were treated with DCs containing pcDNA3-CD40. 15 days later, the diarrhea of rats in each group was observed. Results: the RNA interference vector was successfully constructed and the expression levels of CD40mRNA and protein in DCs were down-regulated by Western blotting and RNA interference vector was successfully constructed. After transfection of DCs, the rats in each group were treated with DCs, and compared with the control group, the rats in the intervention group had diarrhea. The symptoms of mucus purulent stool were obviously improved, diarrhea and mucus purulent stool were aggravated in the overexpressed group, and 2 rats died. Conclusion the intervention of CD40 molecule expression in DCs has therapeutic effect on IBD in rats.
【作者单位】： 吉林大学第二医院消化内科;解放军第208医院消化内科;吉林工程技术师范学院食品工程学院生物工程教研室;
【基金】：吉林省科技厅自然科学基金资助课题(201115086)
【分类号】：R574

【参考文献】

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