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浅议靶向COX-2的shRNA对大鼠肝星状细胞Ccl2、Phlda3、Aldoc、Car9基因表达的影响-硕士论文

发布时间:2016-11-12 14:02

  本文关键词:靶向COX-2的shRNA对大鼠肝星状细胞Ccl2、Phlda3、Aldoc、Car9基因表达的影响,由笔耕文化传播整理发布。


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浅议靶向COX-2的shRNA对大鼠肝星状细胞Ccl2、Phlda3、Aldoc、Car9基因表达的影响-硕士论文

  • 文章导读:胞(HSC-T6),最后在荧光显微镜下评估转染效率。3、利用RT-PCR技术分别检测转染24h,48h,72h后各组Ccl2, Phlda3, Aldoc,Car9mRNA的表达情况。4、对照前期基因芯片结果对比分析各基因的表达情况。结果1、荧光显微镜下可见,COX-2shRNA1在转染大鼠HSC24h,48h及72h后,细胞质中见绿色荧光,各组转染效率有所差异。2、不同组别大鼠肝星
  • 论文正文

    摘要:目的研究靶向COX-2的shRNA对大鼠肝星状细胞凋亡、脂质代谢相关基因Ccl2、Phlda3、Aldoc、Car9表达的影响,同时验证前期基因芯片结果。方法1、实验分为三组:空白对照组、HK空载体组、COX-2shRNA1实验组。2、利用构建的pYr-1.1-hU6-EGFP-COX-2shRNA1,然后将其转染至大鼠肝星状细胞(HSC-T6),最后在荧光显微镜下评估转染效率。3、利用RT-PCR技术分别检测转染24h,48h,72h后各组Ccl2, Phlda3, Aldoc,Car9mRNA的表达情况。4、对照前期基因芯片结果对比分析各基因的表达情况。结果1、荧光显微镜下可见,COX-2shRNA1在转染大鼠HSC24h,48h及72h后,细胞质中见绿色荧光,各组转染效率有所差异。2、不同组别大鼠肝星状细胞COX-2表达情况:在转染24h,48h及72h后,COX-2mRNA在COX-2shRNA1组中的表达低于空白组和空载体组(P0.05),,其中以COX-2shRNA1在转染后72h最明显。3、不同组别大鼠肝星状细胞凋亡相关基因表达情况:在转染24h,48h及72h后,COX-2shRNA1组中凋亡相关基因Ccl2表达下降、Phlda3表达上升(P0.05),且以72h最明显,空白组及空载体组表达无明显差异。4、不同组别大鼠肝星状细胞脂代谢相关基因表达情况:在转染24h,48h及72h后,COX-2shRNA1组中脂代谢相关基因Aldoc, Car9表达下降(P0.05),且以72h最明显,空白组及空载体组表达无明显差异。5、对照基因芯片结果可知,Phlda3, Aldoc, Car9在本实验中表达情况与基因芯片结果一致,而Ccl2的表达情况与基因芯片结果相反。结论1、靶向COX-2的shRNA可以沉默大鼠肝星状细胞COX-2的表达。2、靶向COX-2的shRNA在沉默COX-2后,可促进肝星状细胞凋亡相关基因Phlda3表达。3、靶向COX-2的shRNA在沉默COX-2后,可抑制肝星状细胞脂代谢相关基因Aldoc、Car9表达。4、靶向COX-2的shRNA可能通过调节Phlda3、Aldoc、Car9的表达来促进HSC凋亡。 关键词:环氧化酶2 shRNA 肝星状细胞 Ccl2 Phlda3 Aldoc Car9
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