克罗恩病患者中胰岛素样生长因子-1水平检测的临床观察和实验研究

发布时间：2018-04-14 14:39

本文选题：克罗恩病 + 胰岛素样生长因子-1　；参考：《安徽医科大学》2014年硕士论文

【摘要】：第一部分克罗恩病患者中胰岛素样生长因子-1水平检测的临床观察背景:肠道纤维化是炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)常见且严重的并发症。肠道的慢性炎症及损伤修复导致过度的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)沉积于肠壁。在克罗恩病(Crohn’s disease,CD)中,ECM沉积于肠壁各层,纤维化为透壁性,最终发生肠纤维性狭窄。胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)是胰岛素样生长因子系统(insulin-like growth factor systems,IGFs)成员之一,是重要的促纤维化因子。过度表达可刺激肠道成纤维细胞增殖、转化并合成大量胶原蛋白,在器官纤维化发生过程中起到重要作用。基质金属蛋白酶-2,9(matrix metalloproteinase-2,9,MMP-2,9)是MMPs家族成员,主要参与细胞基底膜IV型胶原蛋白的降解。胶原蛋白是细胞外基质主要结构蛋白,其表达过度与纤维化疾病密切相关。由于本病慢性反复发作、且致残率高的特点,关于CD的纤维化防治已成为临床研究重点。目的:通过检测CD患者中IGF-1水平,探讨IGF-1与CD临床关联,为肠纤维化防治提示理论依据。方法:1.选取临床确诊的70例CD患者,同时选取10名健康体检者作为正常对照组;2.按照蒙特利尔CD表型分类法对CD患者进行分型;3.酶联免疫法(ELISA)检测血浆IGF-1、MMP-2、MMP-9、I型胶原、III型胶原水平。结果:CD组患者血浆IGF-1水平显著低于正常对照组(5.76μg/L±3.22μg/L vs8.82μg/L±3.35μg/L,P0.01);MMP-2、MMP-9、I型胶原蛋白水平显著高于正常对照组(分别为6.34μg/L±1.39μg/L vs 2.99μg/L±1.23μg/L;6.94μg/L±2.05μg/L vs4.14μg/L±1.43μg/L;4.22μg/L±2.61μg/L vs 2.29μg/L±1.41μg/L,P0.05);III型胶原蛋白高于正常对照组,无显著性差异(14.55μg/L±5.48μg/L vs 13.80μg/L±3.40μg/L,P0.05)。在生物学行为中,狭窄型CD血浆IGF-1水平进一步降低,与非狭窄非穿透型及穿透型CD血浆IGF-1水平比较无统计学差异(分别为5.31±2.24μg/L vs5.72±3.38μg/L;5.31±2.24μg/L vs 5.52±2.33μg/L,P0.05);穿透型CD血浆MMP-2水平较狭窄型CD血浆MMP-2水平升高,两组之间差异有统计学意义(8.26μg/L±0.94μg/L vs 5.63μg/L±0.91μg/L,P0.01)。在病变部位中,与结肠及回结肠比较,末端回肠CD患者血浆MMP-9水平明显升高,有统计学意义(分别为7.56μg/L±2.23μg/L vs 5.00μg/L±0.76μg/L;7.56μg/L±2.23μg/L vs 6.46μg/L±0.91μg/L,P0.01)。结论:CD组患者血浆IGF-1明显低于正常对照组;在生物学行为中,狭窄型CD血浆IGF-1进一步降低,可能与狭窄型CD患者生物学行为相关。IGF-1可能参与了CD肠纤维化的发病机制。第二部分TNBS结肠炎大鼠中胰岛素样生长因子-1水平检测的实验研究背景:克罗恩病(Crohn’s disease,CD)是消化道慢性非特异性肉芽肿性疾病,病因及发病机制尚不明确,腹痛、腹泻及肠梗阻为主要临床表现。肠纤维化是其慢性临床过程,进而发展为纤维性狭窄,最终发生肠梗阻。80%CD患者在临床过程中因肠梗阻或肠瘘等至少需要一次外科手术治疗。由于本病慢性反复发作、且致残率高的特点,关于CD的纤维化防治已成为临床研究重点。胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor,IGF-1)是体内重要的生长因子,研究显示与器官纤维化密切相关。基质金属蛋白酶-2,9(matrix metalloproteinase-2,9,MMP-2,9)是MMPs家族成员,参与细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的降解,防止胶原蛋白过度沉积及纤维化形成。胶原蛋白是细胞外基质主要成分,I型及III型胶原为正常肠道中主要胶原蛋白,过度的表达可导致肠壁增厚、疤痕收缩及狭窄形成。胶原生成过度及降解减少可能参与肠道纤维性狭窄的发生。目的:通过TNBS/乙醇溶液诱导制备实验性结肠炎大鼠模型,探讨结肠炎大鼠肠纤维化过程中IGF-1水平改变,为CD肠纤维化防治提供理论依据。方法:1.通过2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠建立实验性结肠炎大鼠模型。对照组予等体积生理盐水灌肠;2.16只SD大鼠随机分成两组(n=8):正常对照组(NS灌肠),模型组(TNBS/乙醇灌肠);3.大鼠结肠炎和肠粘膜炎症评分包括:疾病活动指数评分(DAI)、结肠大体损伤评分(CDMI)、组织学评分(HI)、纤维化评分及髓过氧化物酶(MPO)检测;4.酶联免疫法(ELISA)检测大鼠结肠组织匀浆IGF-1、MMP-2,MMP-9,I型胶原及III型胶原水平。免疫组化染色方法检测IGF-1在结肠炎大鼠肠粘膜表达情况。结果:与正常对照组比较,TNBS诱导的结肠炎大鼠出现大便性状异常,发生不同程度脓血便现象,体重均明显减轻,DAI评分明显增高(P0.01);CDMI、HI和纤维化评分明显增高(P0.01);检测结肠匀浆MPO水平,活性显著升高。与正常对照组相比,实验性结肠炎大鼠肠粘膜中IGF-1、MMP-2、MMP-9、I型胶原及III型胶原水平明显增高(P0.01),IGF-1蛋白表达增加。结论:TNBS结肠炎大鼠肠道粘膜发生炎症反应,纤维化形成;可能机制是MMP-2、MMP-9参与了结肠粘膜炎症损伤,提示IGF-1参与了肠纤维化进程。
[Abstract]:Insulin - like growth factor - 1 ( IGF - 1 ) is one of the main structural proteins of insulin - like growth factor systems ( IGFs ) . The level of type I collagen was significantly higher than that of the control group ( 6.34 渭g / L 卤 1.39渭g / L vs 2.99 渭g / L 卤 1.23渭g / L ; 6.94 渭g / L 卤 2.05渭g / L vs 2.29 渭g / L 卤 1.41渭g / L , P0.05 ) . There was no statistical difference between the levels of IGF - 1 ( 5.31 卤 2.24渭g / L v5.72 卤 3.38渭g / L , 5.31 卤 2.24渭g / L vs 5.52 卤 2.33渭g / L , P0.05 ) . There was a significant difference between the two groups ( 8.26 渭g / L 卤 0.94 渭g / L vs 5.63 渭g / L 卤 0.91 渭g / L , P0.01 ) . Compared with the colon and ileocolic , the levels of plasma MMP - 9 in the end ileum CD patients were significantly increased ( 7.56 渭g / L 卤 2.23渭g / L vs 5.00 渭g / L 卤 0.76 渭g / L ; 7.56 渭g / L 卤 2.23渭g / L vs 6.46 渭g / L 卤 0.91 渭g / L , P0.01 ) . Objective : To study the effect of insulin - like growth factor ( IGF - 1 ) on the pathogenesis of intestinal fibrosis .

【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R574.62

【参考文献】