肝细胞生长因子影响肝星状细胞增殖及凋亡的机制

发布时间：2016-12-05 11:11

  本文关键词：肝细胞生长因子影响肝星状细胞增殖及凋亡的机制，由笔耕文化传播整理发布。

《广西医科大学》 2012年

肝细胞生长因子影响肝星状细胞增殖及凋亡的机制

孟云超  

【摘要】：目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)肝星状细胞(HSCs)共培养体系中肝细胞生长因子激活因子(HGFA)激活肝细胞生长因子(HGF)后对HSCs增殖及凋亡的影响。 方法实验分5组：①阴性对照组：纤维原细胞与HSCs共培养；②HSCs空白对照组：单纯HSCs培养；③BMSCs空白对照组：单纯BMSCs培养；④实验组：HSCs与BMSCs共培养；⑤HGFA干预组：HGFA以70ng/ml干预HSCs。用半透膜transwell insert建立上下双层细胞共培养体系,各组均培养24h、48h及72h,于倒置相差显微镜下观察细胞形态学的变化；用流式细胞仪检测BMSCs的表面抗原及HSCs的凋亡率；免疫组织化学法检测HSCs中α-肌动蛋白(α-SMA)的表达；细胞爬片免疫荧光组织化学染色法检测HGF的激活形式(即HGF-α链)；四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测HSCs的增殖率；酶联免疫吸附法(Elisa法)检测各组细胞培养上清液中HGF及HGFA的浓度。 结果①不同浓度的HGF在各时间段对HSCs增殖无抑制作用,与HSCs空白对照组比较差异无统计学意义(P0.05)；HGFA在各时间段对HSCs增殖有明显的抑制作用,且呈时间、浓度依赖性,在24hHGFA浓度为70ng/ml时抑制作用即开始较HSCs空白对照组明显(0.26±0.00vs0.13±0.04),比较差异有显著统计学意义(P0.01)；②在24h、48h时实验组中HGF-α链的表达量(24h,48h：30.10±3.74,34.30±1.24)与HGFA干预组(24h,48h：32.74±1.72,36.47±2.07)比较差异无统计学意义(P0.05),在72h实验组中HGF-α链的表达量较HGFA干预组的低(37.24±1.03VS40.44±0.77),比较差异有统计学意义(P0.05)；实验组和HGFA干预组在各时间段与各对照组比较差异均有统计学意义(P0.05)；③实验组中HSCs的凋亡率在24h、48h和72h均较HGFA干预组高,在72h最显著(40.77%±1.16%VS33.35%±2.04%),比较差异有显著统计学意义(P0.01)；实验组和HGFA干预组中HSCs的凋亡率在各时间段与各对照组比较差异均有显著统计学意义(P0.01)；④实验组及HGFA干预组的细胞上清液中HGF浓度的降低呈时间依赖性,比较差异有统计学意义(P0.05)；⑤实验组细胞上清液中HGFA的浓度在各时间段均较各对照组高,比较差异有统计学意义(P0.05)。 结论BMSCs与HSCs共培养后促进HGFA的分泌,并激活更多的HGF使其发挥抑制HSCs增殖并促进其凋亡作用。

【关键词】：
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R575.2
【目录】：

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