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DNAM-1在实验性肝纤维化大鼠肝脏中的表达及作用的研究

发布时间:2018-10-26 09:02
【摘要】:目的: 本研究采用免疫组织化学方法及计算机图像定量分析技术研究表面黏附分子DNAM-1(DNAX accessory molecular1,CD226)在实验性肝纤维化大鼠肝脏组织中的表达,探讨DNAM-1在大鼠肝纤维化的作用及可能机制,同时探讨传统抗肝纤维化药物对DNAM-1表达的影响。方法: 健康雄性SD大鼠80只随机分为空白对照组、模型组、丹参组、易善复组共4组,每组20只。25%CCL4橄榄油混悬液背部皮下注射[3ml/(kg·d), CCL4:橄榄油为1:3]造模。同时,除空白对照组、模型组外,予其余两组大鼠丹参水煎液、易善复液灌胃,10周后光镜下观察大鼠肝脏病理组织学改变,进行肝纤维化分期并进行统计学处理。利用免疫组化S-P法,检测各组大鼠肝组织中DNAM-1表达水平并分析其表达与各组疗效的关系及可能机制,应用计算机图像分析技术对免疫组化结果进行定量分析。采用SPSS17.0统计学软件包进行统计学处理。 结果: 1.各组大鼠一般情况观察 随实验天数增加,模型组大鼠饮食饮水量逐渐减少,体重下降,大便干燥,小便泛黄,皮毛疏松无光泽甚至脱落,精神萎靡不振;空白对照组大鼠毛发有光泽,体重均匀增加,体态活泼,食量饮水量及大小便正常;丹参组和易善复组大鼠上述症状较模型组大鼠有不同程度减轻。 2.光镜下实验大鼠肝脏病理学变化 空白对照组大鼠肝脏肝小叶正常,汇管区结构完整、界限清晰,未见纤维组织增生和其他异常;模型组大鼠肝脏细胞肿胀、脂肪变性,正常肝小叶已破坏,坏死区有炎细胞浸润,肝窦多数受压变窄或闭塞,汇管区有大量假小叶形成。丹参组、易善复组大鼠肝细胞坏死较模型组减轻,肝小叶多呈放射状分布,胶原纤维间隔减少,汇管区纤维结缔组织增生不明显。丹参组、易善复组大鼠与空白组大鼠肝纤维化分期比较,差异有统计学意义(P0.05);与模型组大鼠比较,差异有统计学意义(P0.05);丹参组、易善复组大鼠之间的肝纤维化分期无明显差异(P0.05)。Ishak评分的比较:模型组、丹参组和易善复组的肝纤维化评分均高于空白组,差异均有统计学意义(P0.01);而丹参组和易善复组的肝纤维化评分均低于模型组,差异均有统计学意义(P0.01);并且丹参组和易善复组之间的肝纤维化评分无明显差异(P0.05)。 3.免疫组化实验结果 DNAM-1在四组大鼠肝脏组织中均有出现弱阳性、阳性、强阳性三种表达结果。经过非参数法秩和检验多样本两两比较实验统计,结果发现:模型组和空白对照组之间差异有统计学意义(Z=-2.498,P=0.012);丹参组与模型组相比无统计学差异(Z=-0.577,P=0.564),丹参组与空白对照组相比无统计学差异(Z=0.001,P=0.999);易善复组与模型组相比无统计学差异(Z=-0.788,P=0.431),易善复与空白对照组相比无统计学差异(Z=-0.655,P=0.935)。 4.DNAM-1免疫组化定量分析结果 PU值越大,阳性表达强度越高;PU值越小,阳性表达强度越低。经比较DNAM-1在模型组中阳性表达最强,最大PU值达(62.05±10.172);空白对照组中表达最弱,最大PU值仅为(41.65±7.451);丹参组最大PU值为(57.55±4.392),易善复组最大PU值为(54.52±6.539)。模型组DNAM-1表达的阳性强度明显高于空白对照组和药物组。 结论: 1.实验大鼠经CCL4皮下注射10周可诱导具有典型肝纤维化特征的动物模型。 2.病理学观察可见,在CCL4诱导大鼠肝纤维化形成过程中,采用中药丹参、西药易善复进行干预能够减轻大鼠肝纤维化程度。 3.DNAM-1在肝纤维化大鼠肝脏组织中的表达情况,说明了DNAM-1在肝纤维化发生发展过程中发挥了一定的促进作用。在肝纤维化发生发展过程中DNAM-1的作用可能为肝纤维化发病机制提供新的理论依据。 4.经药物干预发现,传统抗肝纤维化中药丹参和西药易善复在大鼠肝纤维形成过程中不能抑制肝脏中DNAM-1的表达,这两种药物可能通过其他途径而不是通过抑制DNAM-1的过表达影响肝纤维化进程。
[Abstract]:......
【学位授予单位】:昆明医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R575

【参考文献】

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本文编号:2295224

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