乙肝表面抗原在酿酒酵母中的异源表达

发布时间：2018-11-15 15:41

【摘要】：乙肝表面抗原HBs Ag是乙肝疫苗的主要组分。从转录水平、翻译水平以及翻译后水平对其进行优化,实现了HBs Ag在重组酿酒酵母中的高效异源表达。与组成型启动子TEF1、TDH3、HXT7、ADH1相比,诱导型启动子GAL1可大幅度提高HBs Ag的表达;与GCCACC和AAAAAA相比,kozak序列TACACA最有利于HBs Ag的翻译表达;而共表达二硫键异构酶pdi对HBs Ag的活性表达具有显著的促进作用。通过3种水平的优化,HBs Ag活性从最初的8.87 IU/g提高至151.08 IU/g;最终,利用Ni柱亲和层析成功获得纯化的HBs Ag,活性为3.32 IU/m L。
[Abstract]:Hepatitis B surface antigen (HBs Ag) is the main component of hepatitis B vaccine. The heterologous expression of HBs Ag in recombinant Saccharomyces cerevisiae was achieved by optimizing the transcription level, translation level and post-translation level. Compared with the constitutive promoter TEF1,TDH3,HXT7,ADH1, the inducible promoter GAL1 significantly increased the expression of HBs Ag, and compared with GCCACC and AAAAAA, kozak sequence TACACA was the most favorable for HBs Ag translation expression. The co-expression of disulfide isomerase pdi significantly promoted the expression of HBs Ag. The, HBs Ag activity was improved from 8.87 IU/g to 151.08 IU/g; at three levels, and the purified HBs Ag, activity was 3.32 IU/m L by Ni affinity chromatography.
【作者单位】： 江南大学工业生物技术教育部重点实验室;江南大学生物工程学院;希森美康生物科技无锡有限公司;江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室;
【基金】：国家863计划重点项目(2011AA100905) 教育部长江学者和创新团队发展计划项目(IRT1135) 国家博士后基金面上项目(2013 M540414) 江苏省优势学科项目
【分类号】：R512.62

【参考文献】

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本文编号：2333712