鞘氨醇激酶1对大鼠急性重症胰腺炎肺损伤的作用研究

发布时间：2019-01-15 23:11

【摘要】：目的：通过选取高效、稳定的方法制备急性胰腺炎动物模型,诱发肺损伤,比较正常组、假手术组、胰腺炎组和鞘氨醇激酶1抑制组,包括鞘氨醇激酶1的蛋白表达及先关的各项指标,研究鞘氨醇激酶1在大鼠急性重症胰腺炎肺损伤中的作用,并探讨其可能的作用机制。方法：将120只SD大鼠随机分成4组：正常组、假手术组、胰腺炎组、鞘氨醇激酶1抑制组,每组30只,其中每组15只用来观察24h生存率。正常组不进行任何操作,假手术组仅行开关腹手术,胰腺炎组采用微量注射泵对大鼠胰胆管进行逆行性注射牛磺酸胆酸钠的方法制作大鼠急性重症胰腺炎模型；鞘氨醇激酶1抑制组在制备大鼠急性胰腺炎模型前从大鼠尾静脉注射鞘氨醇激酶1抑制剂5c的稀释液,余同胰腺炎组模型制备方法。分别观察各组生存率,留取血清进行血清淀粉酶和血清脂肪酶测定,进行血清TNF-α和IL-1β的测定,对左肺组织行组织髓过氧化物酶活性测定,取左肺进行肺泡灌洗测定蛋白含量,取肺组织和胰腺组织行组织病理学检查,采用实时荧光定量聚合酶链反应和流式细胞术的方法检测大鼠外周血中性粒细胞的鞘氨醇激酶1的信使RNA和蛋白表达。两两比较采用独立样本的T检验。结果：1.24h生存指数：正常组和假手术组24h生存率差异不大(P0.05),胰腺炎组与假手术组相比,生存率明显降低(P0.05),鞘氨醇激酶1抑制组与胰腺炎12h组相比,生存率明显升高(P0.05)；2.血清淀粉酶和血清脂肪酶检测：正常组和假手术组血清淀粉酶和血清脂肪酶水平差异不大(P0.05),胰腺炎组与假手术组相比,血清淀粉酶和血清脂肪酶水平明显升高(P0.05),鞘氨醇激酶1抑制组与胰腺炎组相比,血清淀粉酶和血清脂肪酶水平明显降低(P0.05)；3.肺组织髓过氧化物酶测定、肺泡灌洗液蛋白含量测定：正常组和假手术组肺组织髓过氧化物酶活性、肺泡灌洗液蛋白含量差异不大(P0.05),胰腺炎组与假手术组相比,肺组织髓过氧化物酶活性、肺泡灌洗液蛋白含量明显升高(P0.05),鞘氨醇激酶1抑制组与胰腺炎组相比,肺组织髓过氧化物酶活性、肺泡灌洗液蛋白含量明显降低(P0.05)；4.鞘氨醇激酶1活性测定：正常组和假手术组鞘氨醇激酶1活性差异不大(P0.05),胰腺炎组与假手术组相比,Sphk1活性明显升高(P0.05),鞘氨醇激酶1抑制组与胰腺炎组相比,鞘氨醇激酶1活性明显降低(P0.05)；5.胰腺组织和肺组织病理组织学检查：正常组和假手术组胰腺组织和肺组织病理学形态差异不大,胰腺炎组与假手术组相比,胰腺组织和肺组织胰腺组织和肺组织病理学形态明显较重,鞘氨醇激酶1抑制组与胰腺炎组相比,胰腺组织和肺组织病理学病变明显交清较轻(P0.05)；6大鼠血清TNF-α和IL-1β的水平：正常组和假手术组血清TNF-α和IL-1β的水平差异不大(P0.05),胰腺炎组与假手术组相比,胰腺炎组血清TNF-α和IL-1β的水平明显升高(P0.05),鞘氨醇激酶1抑制组与胰腺炎组相比,血清TNF-α和IL-1β的水平明显降低(P0.05)；7.大鼠外周血中性粒细胞中鞘氨醇激酶1信使RNA的表达水平：正常组和假手术组鞘氨醇激酶1信使RNA的表达水平差异不大(P0.05),胰腺炎组与假手术组相比,胰腺炎组鞘氨醇激酶1信使RNA的表达明显升高(P0.05),鞘氨醇激酶1抑制组与胰腺炎组相比,鞘氨醇激酶1信使RNA的表达明显降低(P0.05)；8.流式细胞学检测大鼠外周血中性粒细胞中鞘氨醇激酶1蛋白表达水平：正常组和假手术组鞘氨醇激酶1的蛋白表达水平差异不大(P0.05),胰腺炎组与假手术组相比,胰腺炎组鞘氨醇激酶1的蛋白表达明显升高(P0.05),鞘氨醇激酶1抑制组与胰腺炎组相比,鞘氨醇激酶1蛋白表达明显降低(P0.05)；结论：1.急性胰腺炎大鼠中,外周血中性粒细胞的鞘氨醇激酶1的活性、信使RNA表达、蛋白表达与血清淀粉酶和血清脂肪酶水平,左肺组织髓过氧化物酶活性,肺泡灌洗液蛋白含量,肺组织和胰腺组织的组织病理学检查,表现了相同的变化趋势,说明急性重症胰腺炎肺损伤中,鞘氨醇激酶1可能与急性胰腺炎肺损伤的发生发展密切相关；2.血清炎性因子TNF-α和IL-1β水平与鞘氨醇激酶1的活性、mRNA表达及蛋白表达、血清淀粉酶和血清脂肪酶水平,左肺组织髓过氧化物酶活性,肺泡灌洗液蛋白含量,肺组织和胰腺组织的组织病理学检查呈现了相同的表达趋势,说明鞘氨醇激酶1可能是通过炎性因子的途径参与急性胰腺炎导致的肺损伤的病理生理过程的。3.鞘氨醇激酶1抑制组的外周血中性粒细胞的鞘氨醇激酶1的活性,信使RNA表达和蛋白表达,血清淀粉酶和血清脂肪酶水平,左肺组织髓过氧化物酶活性,肺泡灌洗液蛋白含量,肺组织和胰腺组织的组织病理学检查,相比胰腺炎组出现了明显的下降或减轻,说明比其他抑制剂更低毒性的SKI 5c可能成为急性重症胰腺炎肺损伤的一种治疗手段。
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【学位授予单位】：四川医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R576

【参考文献】