溶酶体相关膜蛋白3过表达促进肝细胞脂质沉积

发布时间：2019-02-28 21:46

【摘要】：目的探讨溶酶体相关膜蛋白3(lysosome associated membrane protein 3,LAMP3)对肝细胞脂质代谢的作用。方法以肝癌细胞系Huh7为研究对象,利用qRT-PCR及Western blot法检测游离脂肪酸(free fatty acids,FFAs)0.4 mmol/L处理后肝细胞LAMP3表达变化;过表达LAMP3后,分别使用油红染色及甘油三酯检测试剂盒检测肝细胞内脂滴及甘油三酯沉积情况;采用ATP及β-羟基丁酸检测试剂盒检测细胞内ATP及β-羟基丁酸含量变化;过表达LAMP3,使用qRT-PCR、Western blot法检测脂质合成相关基因PPARγ与SCD-1及脂质分解相关基因CPT1A与PGC-1α表达变化。结果 FFAs处理后肝细胞Huh7中LAMP3表达显著上调(P0.05);过表达LAMP3可显著促进肝细胞内脂滴和甘油三酯的沉积(P0.05);过表达LAMP3对肝细胞内ATP及β-羟基丁酸含量的影响差异无统计学意义(P0.05);过表达LAMP3可促进PPARγ及SCD-1表达(P0.05),但对CPT1A、PGC-1α表达的影响差异无统计学意义(P0.05)。结论 LAMP3可通过调控脂肪合成促进肝细胞内脂质沉积。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of lysosome associated membrane protein 3 (lysosome associated membrane protein 3, LAMP3) on lipid metabolism in hepatocytes. Methods qRT-PCR and Western blot methods were used to detect the expression of LAMP3 in hepatocellular carcinoma cell line Huh7 treated with 0. 4 mmol/L of free fatty acid (FFA). After overexpression of LAMP3, lipid droplets and triglyceride deposition were detected by oil red staining and triglyceride assay kit, ATP and 尾-hydroxybutyric acid contents were detected by ATP and 尾-hydroxybutyric acid assay kit. Overexpression of LAMP3, was used to detect the expression of lipid synthesis related genes PPAR 纬 and SCD-1, and lipid decomposition related genes CPT1A and PGC-1 伪 by qRT-PCR,Western blot method. Results the expression of LAMP3 in hepatocyte Huh7 was significantly up-regulated after FFAs treatment (P0.05), and over-expression of LAMP3 could significantly promote the deposition of lipid droplets and triglycerides in hepatocytes (P0.05). The effect of over-expression of LAMP3 on the content of ATP and 尾-hydroxybutyric acid in hepatocytes was not statistically significant (P0.05). Overexpression of LAMP3 could promote the expression of PPAR 纬 and SCD-1 (P0.05), but there was no significant difference in the expression of CPT1A,PGC-1 伪 (P0.05). Conclusion LAMP3 can promote lipid deposition in hepatocytes by regulating fat synthesis.
【作者单位】： 第三军医大学新桥医院消化内科;第三军医大学新桥医院内分泌科;
【基金】：国家自然科学基金面上项目(81471039) 重庆市基础与前沿研究计划项目(CSTC2016jcyj A0093)~~
【分类号】：R575

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本文编号：2432197