谷氨酰胺对DSS诱导的小鼠结肠炎的治疗作用及机制

发布时间：2019-10-28 11:05

【摘要】：目的:探讨谷氨酰胺(Gln)对DSS诱导的小鼠结肠炎的治疗作用及机制。方法:8周龄BALB/c小鼠随机分为3组:Control组:对照;Gln组:DSS诱导结肠炎(4%DSS,7 d)+Gln治疗(1.5 g/kg,4周);DSS组:DSS诱导结肠炎。4周后处死小鼠评估结肠炎症、疾病活动度、上皮细胞凋亡、肠黏膜炎症因子及NF-κb(p65)信号通路。结果:Gln显著降低了DSS模型小鼠的结肠炎症、疾病活动度及上皮细胞凋亡。Gln抑制了肠黏膜NF-κb(p65)信号通路。结论:Gln治疗可减轻肠道炎症,降低肠上皮细胞凋亡,这可能是通过抑制肠黏膜NF-κB(p65)信号通路。
【图文】：

缡?方法参照文献［6］，依据说明书提取细胞核和细胞浆蛋白，采用Bradford法定量蛋白，按1∶4比例加入5×loading沸水中煮10min，变性，按每孔加入35微克蛋白，电泳、转膜后封闭1h，加入p65、IKK、I-κB、H3或β-actin(1∶1000，Abcam公司)一抗稀释液，4℃摇床12h，加入二抗后，洗膜，滴加ECL显影液，采用ImageJ软件进行灰度值分析。1.3统计学方法数据采用SPSS19.0软件进行统计分析。计量资料以x±s表示，比较采用t检验。P＜0.05定义为差异具有统计学意义。2结果2.1Gln对DSS小鼠结肠炎症程度及疾病活动度的影响如图1A所示，经7dDSS诱导成功建立了结肠炎模型，Control组无明显炎症，Gln组经4周Gln治疗结肠炎症显著减轻。结肠炎症评分显示(图1B):Gln组小鼠结肠炎症评分高于Control组，但显著低于DSS组，差异均具有统计学意义(P＜0.05)。小鼠疾病活动度评估显示(图1C):Gln组小鼠DAI评分高于Control组，但显著低于DSS组，图1结肠炎症及疾病活动度Fig．1ColoninflammationanddiseaseactivityNote:Magnification:200times;thedataareexpressedasthex±s，*.P＜0.05.差异均具有统计学意义(P＜0.05)。2.2Gln对小鼠肠上皮细胞凋亡的影响如图2所示，DSS模型小鼠肠上皮细胞凋亡数目显著高于Control组(P＜0.05);Gln组小鼠肠上皮细胞凋亡数目高于对照组(P＜0.05)，却低于DSS组(P＜0.05)。2.3Gln对肠黏膜炎症因子的影响如图3所示Gln治疗后，小鼠肠黏膜TNF-α低于DSS组(P＜0.05)，与Control组相比无明显差异(P＞0.05);三组小鼠肠黏膜IL-10含量无明显差异(P＞0.05);Gln组小鼠肠黏膜IL-1β及IL-6高于Control组，却低于DSS组，差异均有统计学意义(P＜0.05)。2.4Gln对小鼠肠黏膜NF-κB(p65)的影响如图4所示DSS组小鼠肠黏膜p65及p

经7dDSS诱导成功建立了结肠炎模型，Control组无明显炎症，Gln组经4周Gln治疗结肠炎症显著减轻。结肠炎症评分显示(图1B):Gln组小鼠结肠炎症评分高于Control组，但显著低于DSS组，差异均具有统计学意义(P＜0.05)。小鼠疾病活动度评估显示(图1C):Gln组小鼠DAI评分高于Control组，但显著低于DSS组，图1结肠炎症及疾病活动度Fig．1ColoninflammationanddiseaseactivityNote:Magnification:200times;thedataareexpressedasthex±s，*.P＜0.05.差异均具有统计学意义(P＜0.05)。2.2Gln对小鼠肠上皮细胞凋亡的影响如图2所示，DSS模型小鼠肠上皮细胞凋亡数目显著高于Control组(P＜0.05);Gln组小鼠肠上皮细胞凋亡数目高于对照组(P＜0.05)，却低于DSS组(P＜0.05)。2.3Gln对肠黏膜炎症因子的影响如图3所示Gln治疗后，，小鼠肠黏膜TNF-α低于DSS组(P＜0.05)，与Control组相比无明显差异(P＞0.05);三组小鼠肠黏膜IL-10含量无明显差异(P＞0.05);Gln组小鼠肠黏膜IL-1β及IL-6高于Control组，却低于DSS组，差异均有统计学意义(P＜0.05)。2.4Gln对小鼠肠黏膜NF-κB(p65)的影响如图4所示DSS组小鼠肠黏膜p65及p-p65表达均显著图2肠上皮细胞凋亡Fig．2IntestinalepithelialcellapoptosisNote:Magnification.200times;Thedataareexpressedasthex±s，*.P＜0.05.图3Gln对肠黏膜炎症因子的影响Fig．3ImpactofGlnonintestinalmucosainflammat-ionfactorsNote:Thedataareexpressedasthex±s.*.P＜0.05.·964·中国免疫学杂志2015年第31卷
【作者单位】： 湖北民族学院附属民大医院急诊外科;湖北民族学院附属民大医院普外科;湖北恩施州中心医院妇产科;武汉大学基础医学院;
【分类号】：R574.62

【共引文献】

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本文编号：2553078