隔日禁食对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝功能及血脂代谢的影响

发布时间：2020-02-27 06:49

【摘要】：目的:非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)的发生率随着人们生活方式的改变不断增高。目前，NAFLD的主要治疗方法包括非药物治疗和药物治疗。非药物治疗包括运动锻炼、减少热量摄入、减小腰围、控制体质量等生活方式的改变，药物治疗包括胰岛素增敏剂、他汀类等。NAFLD与饮食结构不合理所致的营养失衡密切相关，单纯依靠药物治疗，效果并不理想。饮食干预能否安全有效的延缓，甚至阻止NAFLD的进展值得深入、广泛地探索。间断性禁食(intermittent fasting, IF)是一种新形式的饮食方案，通常采用隔日禁食(alternate day fasting, ADF)的方式，即空腹1日，再自由饮食1日。国外研究资料表明，ADF具有降低空腹血糖和胰岛素浓度、改善胰岛素抵抗的作用，以及降低心率、血压、血清总胆固醇和甘油三酯，提高高密度脂蛋白浓度的效应。但其具体作用机制目前尚不清楚，有待进一步研究。另一种饮食干预-热量限制(caloric restriction, CR)，具有相似的作用，并且国内外相关研究已较多。自CR能延缓衰老的学说提出以来，其生物学效应越来越引起人们的重视。研究表明，CR可以减轻体重，下调血压，提高胰岛素敏感性，降低胆固醇水平，并且可以使老龄动物的一些生理状态恢复到年轻时的水平，如对外界刺激反应的敏感性等。本实验以持续高脂饮食建立大鼠NAFLD模型，以不同饮食干预方式为对照，观察ADF对NAFLD大鼠肝功能及血脂代谢的影响，探索该饮食方案的有效性和可行性,为临床有效的防治NAFLD提供新的方法和实验依据。方法：选用健康雄性50只Wistar大鼠,随机分为空白对照组（12只）和模型组（38只）。后者以高脂饲料饲养建立NAFLD大鼠模型，8周末，每组随机处死2只，以证实造模成功，后再将模型组大鼠随机分为四组：对照组（n=9），给予标准饲料自由饮食；ADF组（n=9），给予标准饲料隔日禁食；CR组（n=9），给予标准饲料，热量摄入量为对照组的60%；高脂组（n=9）,给予高脂饲料自由饮食。空白对照组剩余10只，给予标准饲料自由饮食。各组大鼠分笼喂养，自由饮水。12周末处死所有大鼠，采集血清标本，检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL-C）、体质量、肝指数及肝组织病理学。 1大鼠一般情况观察：观察记录大鼠一般情况，如精神、活动、进食情况、毛发、体重变化等。 2肝脏组织病理学观察：HE染色观察肝脏脂肪变、炎症活动及气球样变程度。 3大鼠体质量及肝指数的测定：称大鼠体质量及肝湿重，计算肝指数（肝湿重/体质量）。 4大鼠血清肝功能及血脂水平的检测：丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP），应用全自动生化分析仪，酶法测定。总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL-C），应用全自动生化分析仪，采用终点比色法及终点法测定。 5统计学分析：实验数据采用SPSS16.0进行统计学处理，检测数据正态性及方差齐性，多组间比较采用单因素方差分析，各组间比较采用Student-Newman-Keuls检验，以P＜0.05为具有统计学意义。结果： 1实验动物一般情况观察：空白对照组大鼠活泼，毛发有光泽。对照组大鼠活动减少，毛发欠光泽，食欲可，体重逐渐增加。ADF组和CR组大鼠活动增加，反应灵敏，毛发光泽，睡眠、食欲佳，体重略增加。高脂组大鼠形体肥胖，活动少且迟缓，毛发发黄、蓬乱，摄食增多，睡眠增多，体重明显增加。ADF组及CR组大鼠一般情况较高脂组明显改善。 2肝脏组织病理学观察：空白对照组大鼠肝小叶结构正常，肝板排列整齐，无脂肪变性。高脂组大鼠肝细胞内可见大小不等、数量不一的脂肪滴空泡，可将细胞核挤压向胞膜，炎症细胞浸润。ADF组和CR组大鼠肝组织肝小叶结构完整，，无变性坏死、炎性细胞浸润及纤维组织增生，仅个别细胞内有少量脂滴。对照组大鼠肝组织结构尚完整，肝小叶结构可，少许肝细胞内可见大小不等、数量不一的脂肪滴空泡，少许炎性细胞浸润，未见纤维组织增生。ADF组及CR组大鼠肝组织损伤程度较高脂组明显减轻。 3大鼠体质量及肝指数的测定：高脂组大鼠体质量、肝指数较空白对照组显著升高（P＜0.05）；ADF组、CR组体质量、肝指数较高脂组显著降低（P＜0.05）；ADF组、CR组体质量、肝指数较对照组显著降低（P＜0.05）；ADF组体质量较CR组显著降低（P＜0.05）,而ADF组肝指数与CR组相比差异无统计学意义。 4大鼠血清肝功能水平的检测：高脂组大鼠血清ALT、AST、ALP较空白对照组显著升高（P＜0.05）；ADF组、CR组ALT、AST、ALP较高脂组显著降低（P＜0.05）；ADF组ALT、AST、ALP较对照组显著降低（P＜0.05）；ADF组ALP较CR组显著降低（P＜0.05），而ADF组ALT、AST与CR组相比差异无统计学意义。 5大鼠血脂水平的检测：高脂组大鼠血清TC、TG、LDL、VLDL较空白对照组显著升高（P＜0.05），HDL-C较空白对照组显著降低（P＜0.05）；ADF组、CR组大鼠血清TC、TG、LDL、VLDL较高脂组显著降低（P＜0.05），HDL-C较高脂组显著升高（P＜0.05）；ADF组大鼠血清TC、TG、LDL、VLDL较对照组显著降低（P＜0.05），HDL-C较对照组显著升高（P＜0.05）；ADF组大鼠血清LDL、VLDL较高CR组显著降低（P＜0.05），TC、TG、HDL-C与CR组相比差异无统计学意义。结论： 1高脂饮食可成功建立非酒精性脂肪性肝病模型。 2隔日禁食在高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病中，具有一定的改善作用，其机制可能为通过提高胰岛素的敏感性、调节脂代谢紊乱，而起到降脂、保肝作用。 3隔日禁食与热量限制在改善非酒精性脂肪性肝病肝脏损伤上作用相似，而在调节血脂代谢异常方面可能优于热量限制。 4较单纯恢复正常饮食，隔日禁食在改善非酒精性脂肪性肝病方面，效果更佳。
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R575.5

【参考文献】