IL-18与poly I:C激活的NK细胞对肝星状细胞的杀伤作用及机制的研究

发布时间：2020-03-26 03:20

【摘要】：背景:多种原因导致的持续性肝损伤使瘢痕组织逐渐替代正常肝小叶结构,引发肝脏的纤维化,进一步发展为肝硬化。迄今为止,由于缺少有效的治疗手段,肝纤维化依旧是世界范围的健康难题。肝星状细胞是肝脏纤维发生的关键。自然杀伤(Natural Killer,NK)细胞通过抑制肝星状细胞,进而抑制肝纤维化进展的现象已有报导。在我们实验室的前期研究中发现,Toll样受体3的配体poly I:C可以诱导肝Kupffer细胞分泌IL-18,继而激活NK细胞。由此,我们假设poly I:C与IL-18可以协同激活NK细胞,而激活后的NK细胞具有对肝星状细胞的抑制作用。如果假设成立,进一步研究NK细胞的激活及其对肝星状细胞发挥抑制功能的相关机制。方法:为了验证NK细胞的激活,我们首先从健康成人的外周血分离纯化NK细胞,体外使用IL-18、poly I:C刺激,通过流式细胞术检测NK细胞表型,通过细胞内染色与ELISA检测IFN-γ的分泌。为了研究NK细胞激活的信号传导,我们使用western blot检测IL-18、poly I:C单独与共同刺激时,NK细胞内部分信号分子的磷酸化。通过细胞共培养,研究NK细胞与研究激活后的NK细胞对肝星状细胞的调控。肝星状细胞的凋亡通过PI、AnnexinV的染色鉴定。结果:IL-18与poly I:C协同激活NK细胞的CD69和TRAIL的表达,以及IFN-γ的分泌。IL-18与poly I:C通过p38 MAPK/PI3K信号通路激活NK细胞。激活后的NK细胞通过脱颗粒效应杀伤肝星状细胞。激活的NK细胞膜上表达的TRAIL参与了NK细胞对肝星状细胞的脱颗粒效应以及杀伤作用。结论:IL-18与poly I:C通过p38 MAPK/PI3K协同激活的NK细胞,通过TRAIL参与的脱颗粒效应杀伤肝星状细胞。
【图文】：

肝星状细胞的功能

图 1.2 NK 细胞杀伤 HSC 的机制[80]基于 IL-18 与 poly I:C 可以提高 NK 细胞的 IFN-γ 的分泌水平以及 TRAIL 的表达水平，我们假设激活后的 NK 细胞可以杀伤 HSC。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R575

【参考文献】

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本文编号：2600873