NIBAN与肝纤维化关系的初步研究

发布时间：2020-04-01 18:16

【摘要】：第一章NIBAN在DMN诱导的大鼠肝纤维化组织中的表达目的：建立二甲基亚硝胺(Dimethylnitrosamine,DMN)诱导的大鼠肝纤维化动物模型,观察大鼠肝纤维化组织中NIBAN蛋白的表达情况。方法：雄性Wistar大鼠18只,体重180g～220g,随机分为正常组和模型组两组,每组9只。适应性喂养1周后,参照Jezequel AM方法制作动物模型。模型组给予1%DMN腹腔注射,1ml/kg,每天一次,每周前三天连续给药,共28天；正常组每只大鼠给予lml/kg的生理盐水腹腔注射,每天一次,每周前三天连续给药,共28天,实验第28天称体重后处死所有大鼠。计算实验前后大鼠体重变化,计算肝指数、脾指数,留取血清测ALB、ALT、AST、TBIL,留取肝脏组织分别行：(1)肝组织病理检查(2)肝组织肝纤维化半定量评分(3)Western Blot检测NIBAN蛋白的表达水平。结果：①实验前后大鼠体重变化：正常组体重明显增加,模型组体重明显降低,两组具有统计学差异(p0.05)。②肝指数、脾指数：与正常组相比,模型组肝指数明显降低(p0.05)；与正常组相比,模型组脾指数明显增加(p0.05)。③肝功能：与正常组相比,模型组ALB水平明显降低(p0.05), ALT、AST、TBIL水平均明显增高(p0.05)。④肝脏纤维化半定量评分(SSS评分)：与正常组相比,模型组肝脏纤维化半定量评分明显增高(p0.05)。⑤肝脏组织中NIBAN表达水平：与正常组相比,模型组NIBAN表达水平明显降低(p0.05)。结论：①成功建立了DMN诱导的大鼠肝纤维化动物模型 ②DMN诱导的大鼠肝纤维化动物模型的肝组织中NIBAN蛋白表达水平明显降低,NIBAN与肝纤维化的形成相关。第二章NIBAN在活化肝星状细胞中的表达目的：探讨NIBAN在肝纤维化中的作用,观察肝星状细胞活化后NIBAN蛋白的表达情况。方法：以肝星状细胞(LX-2)株为研究对象,分为对照组和模型组,模型组肝星状细胞予以TGF-β10ng/ml刺激48小时,运用Western Blot检测α-SMA、FN、NIBAN的表达水平。结果：与对照组相比,模型组α-SMA表达明显上升(p0.05),FN表达明显上升(p0.05),NIBAN表达明显降低(p0.05)。结论：肝星状细胞活化后NIBAN蛋白的表达水平明显降低。
【图文】：

肝纤维化,纤维化,大鼠,保守基因

I型、III型胶原等[10]。目前大量的研究认为在肝星状细胞内，TGF-pi是一种最重要的纤维化刺激因子（图1) 在肝纤维化的发生、发展过程中发挥关键作用[9]。近年来随着科学研究技术的进步，我们对肝纤维化发病机制的认识不断深化，但肝纤维化发病机制复杂，目前已有的研究结果并不能完全解释肝纤维化的发病过程，我们认为应该存在尚未引起重视的、可以影响纤维化过程的新蛋白、新机制。NIBAN蛋白是2000年发现的一种新蛋白，其基因又被称为FAM129A[i6]，是一个最新发现的单独的保守基因，位于人类及小鼠1号染色体，大鼠13号染色体[1力，大小约为6.5kb [18]，，包含14个外显子[13。大鼠NIBAN蛋白为含有937个氨1

脾脏,外观,脾指数,肝指数

脾脏大体：正常组脾脏大小、形态均正常，边缘锐利。模型组脾脏体积增大，厚度增加，边缘钝。（图3)锤正常组肝脏模型组肝脏正常组脾脏模型组脾脏图3两组大鼠肝脏、脾脏外观1 A3肝指数脾指数如表5、图4所示，肝指数：正常组肝指数为0.031015±0.002011、模型组的肝指数为0.020199±0.003452，与正常组相比明显降低，两组具有统计学差异(p<0.05 ) 0脾指数：正常组脾指数为0.00189钍0.000067、模型组脾指数0.004665±0.001821，与正常组相比明显增加，两组具有统计学差异（p<0.05)。表5两组大鼠肝指数、脾指数（3^±S)组别例数肝指数（g/g) 脾指数（g/g)正常组 9 0.031015±0.002011 0.001894±0.000067模型组 6 0.020199士0.003452* 0.004665±0.001821* 与正常组比较，、<：0.0513
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R575.2

【参考文献】