β-防御素2在急性肝损伤大鼠小肠中表达及意义

发布时间：2017-03-22 16:04

  本文关键词：β-防御素2在急性肝损伤大鼠小肠中表达及意义，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：Marshall[1]于1998年正式提出关于肠-肝轴的概念。肝脏和肠道具有共同的胚胎起源:前肠、肠道淋巴细胞是从发育中的肝脏发育而来,大量的研究资料显示肝脏和肠道在解剖学及生物学功能上具有密不可分的关系。在解剖关系上,门静脉是肝脏和肠道联系的桥梁,肝脏80%的血液供应来自门静脉,门静脉有来自肠道的营养物质、食物抗原、细菌产物及环境毒素等。多种原因均可以引起急性肝损伤的发生,急性肝损伤后将会发生一系列的并发症,严重的将会发生急性肝功能衰竭。当肝脏受到损伤时,肝脏的枯否氏细胞功能将被受到抑制,一方面肠道内的细菌及内毒素会入侵血液循环系统导致肠源性的感染;另一方面侵入肝脏的内毒素激活枯否氏细胞,多种炎症因子被释放出来,这些炎症因子相互作用进一步加重肠道粘膜屏障的破坏。防御素存在于肠道上皮细胞中,起到重要的防护作用。β-防御素2(β-defensin-2,HBD-2)的研究是热点问题。β-防御素2作为一种可诱导表达防御素,在皮肤、呼吸道、消化道广泛分布,它具有抗菌活性广,在参与机体先天性免疫及获得性免疫中具有重要作用。肝损伤肠道中β-防御素2表达如何?本实验建立了不同急性肝损伤模型,旨在探讨不同急性肝损伤肠道中β-防御素2的表达。目的:建立不同的肝损伤模型,观察肠道中β-防御素2表达。方法:①选择健康SD大鼠随机分为三组,分别为四氯化碳组、2-AAF/PH组及空白对照组。分别于1d、7d、14d、21d处死动物取肝脏组织和小肠组织。②采用hematoxylineosin staining(HE染色)观察大鼠肝组织及小肠病理组织学表现。③Western Blotting检测技术观察β-防御素2在肠道中蛋白表达。④RT-PCR技术检测观察β-防御素2在肠道中基因表达。结果:①与空白对照组相比,2-AAF/PH组第1天时肝脏颜色为淡红色,质脆,随时间推移约21天后肝脏颜色恢复正常。四氯化碳组与之比较,大鼠肝脏呈暗红色,质脆,约14天后恢复正常;②肝脏组织HE结果显示,与空白对照组相比,四氯化碳组、2-AAF/PH组可见肝细胞肿胀,排列紊乱,炎症细胞浸润。2-AAF/PH组炎症细胞浸润明显比四氯化碳组多,细胞肿胀最严重。③肠道组织病理结果示,2-AAF/PH组肠黏膜损伤较严重,肠黏膜脱落,肠绒毛排列紊乱,炎症细胞浸润,随着肝损伤的修复,肠道损伤恢复正常;四氯化碳组肠黏膜损伤较2AAF/PH组轻,肠黏膜轻度脱落,有少许炎症细胞浸润,也是随着肝损伤的修复,肠道黏膜恢复到正常。④血清肝功能结果显示,大鼠造模成功后第1天空白对照组肝功能没有明显变化;四氯化碳组、2-AAF/PH组与空白对照组相比大鼠丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotrans ferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)水平明显升高(ALT:47.01±9.36 U/L vs 41.98±6.65 U/L,P0.05;249.1±19.72 U/L vs 41.98±6.65 U/L,P0.05;AST:133.96±14.36U/L vs 82.48±21.87 U/L,P0.05;557.97±12.86 U/L vs 82.48±21.87U/L,P0.05;ALP:270.32±36.08U vs 53.27±8.51U,P0.05;520.67±33.01 U vs 53.27±8.51U,P0.05),白蛋白(albumin,ALB)水平明显下降(23.36±2.22g/L vs 32.14±3.73 g/L,P0.05;23.9±1.05 g/L vs 32.14±3.73 g/L,P0.05)。四氯化碳组和2-AAF/PH组之间比较,2-AAF/PH组肝功能变化较大。⑤β-防御素2变化情况:RT-PCR结果显示,空白对照组1天、7天、14天、21天各时间点无明显差别(1.090±0.004 1.092±0.003 1.089±0.002 1.087±0.002 P0.05);四氯化碳组和2-AAF/PH组β-防御素2 m RNA的量,1天、7天、14天三个时间点与空白对照组比较,都增高,具有统计学意义(P0.05),第21天时与空白对照组比较无明显差别,没有统计学意义(P0.05),2-AAF/PH组与四氯化碳组1天、7天、14天比较,都显著升高,具有统计学意义(P0.05),21天与四氯化碳组比较,无明显变化,没有统计学意义(P0.05),在空白对照组各时间点无明显变化(P0.05);Western Blot结果与PCR结果一致,2-AAF/PH组β-防御素-2蛋白水平表达1天、7天、14天(1.90±0.07 1.60±0.02 1.41±0.01)较空白对照组(1.04±0.03 1.04±0.03 1.03±0.01)明显增加,差异有统计学意义P0.05,第21天时(1.06±0.06)与空白对照组(1.04±0.03)比较无明显变化,无统计学意义(P0.05),2-AAF/PH趋势为第1-21天呈下降趋势,第21天时和空白对照组一致;四氯化碳组1天、7天、14天与空白对照组比较随时间变化呈下降趋势,具有统计学意义P0.05,21天时比较无统计学意义(P0.05);并且2-AAF/PH组较四氯化碳组下降更明显,三组间1天、7天、14天比较差异有统计学意义P0.05,21天比较无统计学意义(P0.05)。结论:β-防御素2在急性肝损伤大鼠小肠中表达增加,且随着肠粘膜损伤程度的加重而升高。
【关键词】：模型 炎症 β-防御素2 屏障功能 肝损伤
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R575.3
【目录】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文缩写11-12
• 前言12-13
• 材料与方法13-24
• 结果24-27
• 附图27-35
• 附表35-37
• 讨论37-40
• 结论40-41
• 参考文献41-44
• 综述 β-防御素2在消化性疾病中研究进展44-56
• 参考文献50-56
• 致谢56-57
• 个人简历57

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本文编号：261810